羟基红花黄色素A对MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用.pdf

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1、第35卷第5期西安交通大学学报(医学版)Vo1．35No．52014年9月JournalofXi’anJiaotongUniversity(MedicalSciences)Sep．2014◇中医药研究◇羟基红花黄色素A对MPP+诱导的SH—SY5Y细胞凋亡的保护作用潘剑，李绍平，李建雄。，连佛彦。，黄燕，秦龙(兰州大学第二医院：1．急救中心，2．神经内科，3．内科ICU，4．药学部，甘肃兰州730030)摘要：目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对MPP诱导的SH—SY5Y细胞凋亡的保护作用，并探讨其作用机制。方法采用MTT法检

2、测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率；二乙酸二氯荧光素盐(DCFH—DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量；罗丹明123(Rhodaminel23)染色法检测细胞线粒体膜电位；Westernblot法检测Cyt—C、Bcl一2、Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达。结果1mmol／LMPP。。处理SH—SY5Y细胞48h后，细胞存活率显著降低，并诱导细胞产生凋亡，凋亡率达(38．6±1．8)。而HSYA(15、60、120mol／L)预处理1h，可明显增加SH—SY5Y细胞存活率(P

3、MPP。。诱导的细胞调亡(P％0．01)；可明显抑制MPP诱导的细胞内ROS的增加(P

4、键词：羟基红花黄色素A；SH—SYSY细胞；细胞凋亡；线粒体中图分类号：R285文献标志码：A文章编号：1671—8259(2014)05—0690—05D0I：10．7652／jdyxb201405025ProtectiveeffectsofhydroxysaffloryellowAagainstMpp+-inducedapoptosisinSH-SY5YcellsPANJian，LIShao—ping，LIJian～xiong，LIANFo—yan。，HUANGYan，QINLong(1．EmergencyCenter，2．

5、DepartmentofNeurology，3．IntensiveCareUnitofInternalMedicine，4．DepartmentofPharmacy，LanzhouUniversitySecondHospital，Lanzhou730030，China)ABSTRACT：ObjectiveToinvestigatetheneuroprotectiveeffectofhydroxysaffloryellowA(HSYA)onMPP一inducedapoptosisinSH．SY5Ycellsanditsrelate

6、dmechanisms．MethodsCellviabilitywasanalyzedusingMTTassay．Cellapoptosiswasmeasuredbyflowcytometry．Thelevelofreactiveoxygenspecies(ROS)withinthecellswasanalyzedbyfluorometricprobeDCFH-DAassayandmitochondrialtransmembranepotentialwasrevealedbyrhodamine123staining．Theexp

7、ressionsofcytosolicCyt—C，Bcl一2，Bax，Caspase一3andCaspase一9wereanalyzedbyWesternblot．ResultsThecellviabilitywassignificantlydecreasedby1mmol／LMPP，andthepercentageofapoptosisincreasedto(38．6-_4-1．8)％，butwasreversedbyHSYApretreatmentofdifferentconcentrations(15。60and120,a

8、mol／L)(P<0．001，P<0．01，respectively)．PretreatmentofHSYAreversedtheincreaseofROS，cytosolicCyt—C，Caspase一3andCaspase一9(P<0．001，P<0．05，