细胞培养 第二章 组织培养设施和基本条件.ppt

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1、第二章组织培养设施和基本条件细胞培养设施和基本条件实验室设计原则防止微生物污染和有害因素影响要求工作环境清洁、空气清新、干燥和无烟尘划分不同功能区或用铝合金板隔开无菌操作区应在室内较少走动的内侧清洗和消毒安置在另室一般包括：准备室、培养室和缓冲室准备室：用于进行培养器皿的清洗、包装、培养物质的准备和消毒以及供应物品的保藏等。培养室：用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室。其基本条件是：清洁、无菌、干燥、不通风，并具有适宜的光线。天花板不宜高过2.5M。缓冲室：（更衣室）41缓冲室专用培养实验室布局示意图普通细胞培养室内走廊宽敞的细胞培养区实验室

2、设备一、最常用的大型必备装置和仪器净化工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、离心机、冰箱、电热干燥箱、超纯水装置、消毒锅、超声波清洗器、恒温水浴箱、冷冻保存装置、天平等二、最常用的培养器具l.过滤除菌装置：不锈钢正压过滤器、一次性滤器2.手术器械3.培养器皿：溶液瓶、培养瓶、培养皿、多孔培养板、移液管和吸管、离心管净化工作台（必备！）外流式（基本不用）侧流式直流式超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。注意检查是否堵塞！（看酒精灯）超净工作台结构和模

3、式图CO2培养箱：用于维持适当温度、湿度与pH质量关键在控温装置，温度变化一般不应超过0.5度;培养箱的温度设在35～37℃，这是人和哺乳动物培养细胞的最适温度。培养容器需与外界保持通气状态箱内空气应保持干净，定期消毒（紫外灯、酒精）水槽:保持一定湿度二氧化碳培养箱电热干燥箱烘干和干热消毒玻璃器皿鼓风与升温同时进行，100度时可停止鼓风禁止先升温后鼓风100度以下时再打开箱门金属器械、塑料制品、橡胶等不能在干燥箱内消毒电热恒温鼓风干燥箱高压灭菌锅学生正在进行细胞观察倒置显微镜倒置显微镜水纯化装置很少使用离子交换装置处理的水蒸馏水装置分金属和玻璃

4、两种洗刷装置人工洗刷超声洗涤装置玻璃吸管洗涤自动双重纯水蒸馏器超纯水仪超声波清洗机正压过滤器细胞冷冻贮存器离心机小型台式离心机符合分离细胞要求加样器不锈钢正压过滤器离心机液氮罐OperationofMicropipette1、selectsuitablepipetteandtipsaccordingtothedesiredvolume2、setthevolume3、extractingthesolutionthroughpushingbuttontoposition14、releasingthroughpushingtobottom磁力搅拌器精

5、密PH计微孔板震荡器器械（取材用）解剖刀白内障刀解剖剪虹膜剪镊子注意保护刀锋，钝刀对组织有伤害，不利细胞生长培养器皿玻璃瓶皿（用于储存各种液体）玻璃瓶500毫升、250毫升、100毫升培养瓶培养皿吸管离心管塑料瓶皿多孔培养板4、6、24、96孔培养皿30、60、100毫米培养瓶