PCR扩增产物出现杂带的原因(engreen).doc

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时间:2020-06-18

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1、可能的原因和对应的解决方案如下:1.引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2.循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。3.酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。4.退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的pcr扩增。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。5.样品处理不当。6.Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。7.若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。推荐使用engreen的PCR试剂盒,添加改良的DNA聚合酶,大大提高扩增产物的特异性和保

2、真性。

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