肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察.pdf

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1、中华实验和临床病毒学杂志2014年8月第28卷第4期ChineseJExpClinVirol，August2014，Vo1．28，No．4·245·．论著肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察姚思敏，杨桂林，刘威龙，方木通，周伯平【摘要】目的筛选安全有效新型EV71候选疫苗，为将来EV71疫苗开发应用奠定基础。方法以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点，不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB／c雌性小鼠，在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾

2、静脉血，16周处死小鼠，收集小鼠脾脏细胞，检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能，筛选评价候选疫苗的疗效和安全性。结果灭活病毒疫苗、VPIDNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高，4周后明显升高，8周后达高峰，至少维持16周以上；IgG亚类以IgG2a和IgGl为主。三种疫苗能诱导以-IFN和IL4为主的细胞免疫反应。灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗，未发现疫苗相关不良反应。结论灭活病毒疫苗、VP1DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应，以灭活病毒疫苗疗效较好，需要将来攻毒实

3、验可进一步验证其免疫力。【主题词】肠道病毒属；手足口病Screeningofvaccinecandidatesforenterovirus71associatedhand，footandmouthdiseaseYaoSimin，y口Guilin，LiuWeilong，FangMutong，ZhouBoping．ShenzhenPeople’sHospital，Shenzhen518112，ChinaCorrespondingauthor：ynGuilin，Email：g1．yang@163．corn【Abstract】Obj

4、ectiveToScreenforsafeandeffectivevaccinecandidatesforEV71，provideatheoreticalbasisfordevelopmentofEV71vaccinesinthefuture．MethodsVP1geneofenteroviruswasusedtodesignatargetfordevelopmentofEVT1vaccines．Differentvaccinecandidates，includinginactivatedEV71vaccines，VP1pr

5、oteinvaccine，DNAvaccinesofdifferentdoses，wereusedtochallengefemaleBALB／cmicebyintramuscularinjectionatbaseline(0)，2weeks，4weeks，andcaudalveinbloodwascollectedat0，2，4，6，8，10，and16weeks，andBALB／cmiceweresacrificedandthespleencellswerecollectedfordetectionofbothhumora

6、limmunityandcellularimmunitytoevaluatetheefficacyandsafetyofthevaccinecandidates．ResultsIgGantibodytiterswereincreasedat2weeks．remarkablyincreasedat4weeks，reachedapeakat8weeks，atleastsustainedfor16weeksduringthewholeobservationperiod，subtypesofIgG1andIgG2awerethema

7、jorcomponent．ThethreevaccinescouldinducecellularimmunitycharacterizedbyEV71specific一IFNandIL一4production．OurresultsindicatedthatinactivatedEV71vaccinewassuperiortotheothervaccinecandidates．ConclusionsInactivatedEV71vaccines．VP1proteinvaccine．DNAvaccinescaninducebot

8、hstrongandsustainablehumoralandcellularimmunitiesinchallengedmice．andtheinactivatedEV71vaccineiSsuperiortotheothervaccinecandidates，whichneedstob