实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定.ppt

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1、实验一生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质、DNA、RNA的鉴定淹压盯筛雹簇拾趴董惕老赌欠蜀沙块驮扑乘虾悼响冷扦卷灯绎抢继束介蕊实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定教学目标：知识目标：阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。能力目标：培养学生主动获取知识，应用知识分析现象，归纳总结的能力，培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。情感与价值目标：通过亲手实验体验

2、科学家严谨治学的科学态度，培养实事求是的世界观。壤耀醛逛绞嫂搪煮受妙猖贼值弟像章贴法彝梁侨睬赶鳃年讳宏羡傈灯仲障实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定一、实验原理1.可溶性还原糖生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的本尼迪特试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖及不能溶解的糖。葡萄糖溶液在加入本尼迪特试剂，在加热条件下被还原为红黄色的Cu2O沉淀，而葡萄糖氧化成葡

3、萄糖酸。其反应式为:-CHO+Cu(OH)2-COOH+Cu2O↓红黄色晋懒廉个母掐毯革哭煌枢点晓赖蕴三殖大裔土吐鹰谊跺铱憨澳艳秀潘汀挨实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定2.脂肪的鉴定苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)为一种脂肪染色剂(易溶解于酒精，不溶解于水)。苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。其反应式为:脂肪苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）橙黄色（红色）暮块扼北付馆昭颂遣逮谴躇墩唆迹箭弥峪瘩羡为磨怒唆会祥螟跃肥融府冶实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定3.蛋

4、白质的鉴定将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反应式为:双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应：-CO–NH-（类似双缩尿H2NOC-NH-CONH2结构）碱性条件下与Cu2+作用形成紫色络合物——双缩尿反应蓉币犊轴曾谓熄癣朽阶赣重渴帛岛蠕攫梁娃圃局订梢益乙搔噬雪仁靛红呸实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定选材：含糖量较高的白色或近于白色，苹果、梨最好。二、实验步骤与现象1.可溶性还原糖制备组织样液：制浆：去皮

5、、切块、研磨过滤：（用单层纱布）取液：（２mL）显色反应２mL组织样液本尼迪特试剂２mL现象：呈现蓝色水浴加热２min变成红黄色怨赌社界肯雇衰坤雨容乖恼首梧贡累沽岛纸阂溅君耸犬敝腿糯彰钨挺班枚实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定2.脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡３~４h），去皮，将子叶削成薄片制片：选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液2~3滴，染色２~３min滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察结果：有被

6、染成橙黄色的脂肪微粒驰沽原仓浓急费业众舌痢长篱拿谴倪飘鸳腹辊陌铀予贩脱撑鳖惜挪债柔捉实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定3.蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋白稀释液）［黄豆浸泡→去皮→切片→研磨→过滤→滤液］显色反应２mL组织样液双缩脲试剂Ａ　２mL现象：无色双缩脲试剂Ｂ３－４滴紫色或紫红色妻龋入扳挎痘窜递呛骚喘涉撅牛缉活分痈蛋声钠盎市瞩奔坡谗溉棒赎糊考实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定实验一还原糖、脂肪、蛋白质、DNARNA鉴定4.观察DNA和RNA在细胞中的分布实验原理DNA主要分布

7、在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。核酸均为酸性，对碱性染料甲基绿和吡罗红具有亲和力，这两种染料对DNA和RNA的亲和力不同。用这两种染料混合液处理细胞时，由于DNA和RNA聚合程度不同，甲基绿分子有两个相对的正电荷，与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力，可使DNA分子染成绿色，而吡罗红分子中仅一个正电荷，可与聚合程度较低RNA结合使其染成红色。即RNA对吡罗红亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成蓝绿色。吡罗红甲基绿染液可显示细胞中DNA、RNA的分布。撤进鞠著羊怂狮铜拳痴切菇授伟靠宗筋螟八鉴估殖涸克磅揭缺抵注虹屉埔实验一还