实验二 徒手切片与临时装片的制作.ppt

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1、实验二徒手切片与临时装片的制作授课教师：郑磊2008.12.04实验目的与要求熟练掌握徒手切片技术，能够切出只有一层细胞的切片。实验器材与用具显微镜、培养皿、单面刀片、双面刀片、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸。实验材料与试剂实验材料新鲜的吊兰茎和叶、芹菜叶柄、黄豆芽，胡萝卜（支持物）。试剂1%番红水溶液、45%醋酸。实验原理徒手制片一般指徒手用刀片把新鲜的或固定好的植物材料切成薄片，不经染色或经简单染色后用水封片制成临时制片的方法。此制片法主要优点是：（1）能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩；（2）方法及用具简单，不需切片机等机械设备，短时间即可完成。主要缺点是：（1）

2、对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料，难以用徒手切成薄片；（2）不能制成连续的切片；（3）对于操作不熟练者，往往难以切成厚薄均匀和完整的切片。实验方法材料的准备和修整将植物茎切成2~3cm长的小段，并将其切面削平；若为质地较软而薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽5~6mm、长1~1.5cm的小块，夹在支持物中进行切片。支持物通常为萝卜、胡萝卜、马铃薯、通心草等。先将支持物切成高3~5cm、长、宽0.5cm的立方体小块，将其中部纵切一缝，然后将修整好的材料夹在其中。切片切片前在培养皿内盛放适量清水。以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指应低于食指，以免切伤手指，材料高出食指2

3、~3mm。切片前，用水润湿刀片，以减少切片阻力。右手执刀，将刀片平放在左手食指上，刀口朝内，刀面与材料断面平行，然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀片水平切割，不要用腕力。同时还要注意，切时动作要迅速，材料一次切下，切忌停顿或拉锯式切割。切下数片后，用湿毛笔轻轻将薄片移入清水中，防止材料萎蔫。染色与镜检若要观察植物组织的天然色彩：挑选薄而透明、平整的切片，放在载玻片上，水封，制成临时装片。若想染色以观察更清楚的切片：采用单染色，即用1%番红水溶液染色3~5min，用蒸馏水洗去浮色，水封，镜检。观察材料剃刀双面刀片拿材料的手势胡萝卜木髓切取标本切取的标本擦拭载玻片滴

4、水放置标本加盖盖玻片叶的横切玉米茎横切南瓜茎横切南瓜茎纵切任务与要求1.制作一张合格的徒手切片。2.在制作徒手切片的过程中，你遇到了哪些问题，如何避免？ThankYou!