实验一---徒手切片的制作课件.ppt

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1、实验须知1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即报告指导教师。2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。实验过程应养成及时记录的习惯——实验中应如实记录原始数据和实验现象，并严格遵守实验规则。3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器应及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。4．公用仪器及药品用完后

2、立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。节约用水、用电、药用试剂。严格药品用量。5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。实验分组每个桌面坐7个人，2或3个人为一小组，7个人为一大组。实验报告要求1、实验前认真预习实验内容，毋须写预习报告，合理安排好实验时间。2、实验完成后，根据实验内容写一份真实的实验报告。下一次实验时以班级为单位上交上一次的实验报告。3、请假者，请及时上交实验报告。徒手切片的制作医学与生命科学学院徒手切片法用手直接拿刀片把植

3、物新鲜材料切成薄片，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察，亦可以通过脱水与染色制成永久制片。优点简单、方便；不需要复杂设备；不经化学药物处理，基本上保留了植物活体的状态。局限性难以把过硬或者过软的材料制成薄片，对需制作连续切片且厚度要求在几微米时该法更无能为力。徒手切片的制作一、实验材料及器材的准备二、实验材料的处理三、握夹持物和持刀四、切片五、制片六、注意事项实验器材的准备1、锋利的刀片2、洁净的载玻片、盖玻片3、盛清水的培养皿4、毛笔、镊子等1、软硬适中、便于手持的材料，一般截成小块（长2～3cm，切片断面不超过3

4、～5mm2）。2、过于柔嫩的器官，可选用胡萝卜根或土豆块茎作为夹持物。夹持物截成规范的小块，再用刀从一端的中线纵向劈开（不要劈到底），以夹住材料。如新鲜叶片，切去叶柄、叶尖和叶缘后，切成长度和宽度都小于夹持物劈缝的长方块，再放入夹持物劈缝中。3、有些叶片可以卷成圆筒再进行切片。实验材料的处理用左手的拇指和食指捏紧夹有叶片的夹持物，并使其劈缝与自己本身平行，拇指要稍低于食指，以免被刀割破。夹持物上端要略高于手指，但勿过高，以防切割时夹持物和刀摇动。右手拿刀将刀片平稳地放在左手食指上，与材料切面平行。握夹持物和持刀这是切片的关键阶段。沾水的刀口保持

5、水平对着夹持物,自左前方向右后方，以均匀、快捷的动作，斜着向后进行连续拉切。切时用臂力而不用腕力。如此循环多次，切下许多薄片后，把切下的薄片，迅速用毛笔刷入清水中备用。切片用毛笔挑选透明的薄片，制临时装片。选片临时装片技术首先将载玻片、盖玻片用纱布拭擦干净，拭擦玻片动作要轻，手指用力要均匀，否则易拭破。在载玻片中央，滴加一、二滴清水，然后用毛笔取培养皿中切好的材料置于载玻片上，将盖玻片轻轻盖上，盖盖玻片时，用镊子夹起盖玻片，使载玻片一边先放下，接触一边水，然后再轻轻放平，以免水中产生气泡，影响观察。如仍有气泡，可用镊子轻轻加压盖玻片，将气泡赶出

6、。如水分过多，可用滤纸条将水吸干，如水分不足，可在盖玻片边沿用滴管加水少许。使材料浸没水中，盖玻片紧贴载玻片，这样装片制成。将切下的薄片放在载玻片上时，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用镊子夹住盖玻片，将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴，然后用镊子顶住盖片的另一侧，慢慢放下，使盖玻片与载玻片之间充满水，如有气泡，要掀起盖片，重新放置。徒手制作的切片可以直接在光镜下观察，也可以经过简易的组织化学染色，以使结构看得更清楚，同时可观察到细胞各部分的化学成分。染色的方法是将切片放在载玻片上后，用吸水纸吸去多余的水分，滴上一滴染料，经过1

7、～2min后，用水冲洗一下，盖上盖玻片，在显微镜下观察。1.取材选取待观察的植物材料初步切取大约3cm长的小块再依切片的具体要求，将组织块修整为0.5cm的材料块。2.切片以左手夹住材料，用右手平稳地握住刀片。切片时，使刀片与材料的断面保持平行，刀口自左上方斜向右下方，动作要均匀有力。材料与刀片须常以水湿润。切下的薄片立即用毛笔蘸水后粘取移入盛有清水的培养皿内。3.选片切片完整，在培养皿中选择薄而均匀且切面完整的组织切片，捞在载玻片上作临时水装片，然后置于显微镜下观察，如结构能被清晰地显示出来，则可制成永久保存封片。临时装片制作步骤1、在切片前

8、，要不断地用水湿润材料和刀片。2、夹持物上端要保持表面平整。3、切片时，双手应该保持活动状态，不要使它们紧靠身体或实验台。4、用力不要过猛，不能用刀片