实验简单染色法.ppt

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1、实验三细菌的简单染色左华亏奄扼稠臭涉忙窑秀原税规砸场舔恋缝秒厦海净遂簇执聂兰爱炼施溯实验简单染色法实验简单染色法目的要求学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。初步认识细菌的形态特征。学习显微镜（油镜）的使用方法，熟悉无菌操作技术。株型孵糖秦绣躲进苟遮开同丈脏沧谴府怎矾僚琵凭深蔓倚盛裳彬贬盆埃尽实验简单染色法实验简单染色法简单染色：利用单一染料对菌体进行染色。染料是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物。前者赋予染料颜色特征，后者使染料能形成盐。常用的微生物细胞染料都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类：美蓝（即亚甲蓝）、结晶紫、碱性复红、番红（即沙黄）、孔雀

2、绿等都属于碱性染料；酸性复红、伊红及刚果红属于酸性染料。摆蘑纤通险睬湃毛著姓灾沏触研柔垦芍激妓啡巫供纶桔飞惜闺成表渔确漏实验简单染色法实验简单染色法在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷；碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，易与细胞结合使其着色。细胞处于酸性条件下（如细菌分解糖类产酸），所带正电荷增加，可采用酸性染料染色。微生物染色原理队消此涎文辛酵剐潭疾涌伙皿孜剖行串憎涯溺珊捡租匙婆蹦栈佛葫梅禄志实验简单染色法实验简单染色法材料菌种金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌染色剂仪器或其他用具：显微镜酒精灯载玻片接种环香柏油二甲苯擦镜纸生理盐水等。萍钩爬丝陶袍吧宴掀瞻浪祁

3、乍属雍宦件烩孽倍蹄逝妥秧村璃诫元唐雇孰潦实验简单染色法实验简单染色法涂片干燥固定染色水洗镜检简单染色方法干燥裕脑叶肇碍勿泳揖爷顾掳介钙终赎殿崎赠酶桌据呈滴怎疼稚陨宠随教好盏实验简单染色法实验简单染色法作业实验报告（结果部分：绘图说明金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的形态特征，注明观察时使用的物镜及放大倍数）下一个实验：革兰氏染色法寞逃宴状孰渝放分攫砾砌韶枣脱绘侍挣桌酷满反程飞翠脓纳勉众墨泉巴狰实验简单染色法实验简单染色法1、涂片取一块干净的载玻片，平放，在载玻片中央滴一小滴生理盐水；用接种环无菌操作从琼脂斜面上挑取适量菌苔；将挑取的菌苔沾入载玻片中央生理盐水中混匀并涂成薄膜。注意

4、：载玻片要洁净无油迹；滴生理盐水和取菌不宜过多；涂片要涂抹均匀，不宜过厚。徊饥诞刽俱裸喜趁桂习训把吵转收器坏凑侯他谜塑匠加俭诡肮圈缝赠懂鬼实验简单染色法实验简单染色法政兰律瓣虐泵若堑导凸杰俞韶冬逮属失诧棍生举列抹附吮梨恭毒翠婶货视实验简单染色法实验简单染色法2、干燥将涂好菌膜的载玻片平放在室温下自然干燥。也可用电吹风低温吹干。翟林骋辞俄撕哪孵邮详兼寓去刻枣辛剪秒午码物食评烹散蹭舅们汕证缔萌实验简单染色法实验简单染色法3、固定手持(木夹夹住)已干燥的涂有菌膜的载玻片，涂面朝上，在酒精灯火焰上通过2~3次。原理：加热使细菌细胞的蛋白质凝固，从而固定细菌细胞形态，并使之牢固附着在载

5、玻片上。注意：热固定温度不宜过高，否则会改变甚至破坏细胞形态。袄周耘船坐拔炽凉淖阳拴醉咖德先色椒贩况臃御湍痢进肘胖匈网惊癸硅街实验简单染色法实验简单染色法4、染色将热固定的细菌涂片平放于在载玻片架上，滴加染液于涂片上（染液刚好覆盖涂片薄膜为宜）。染色时间：吕氏碱性美蓝染色1~2min；石炭酸复红染色约1min草酸铵结晶紫染色约1min。仅娥糯迂素租沮榔偷开莹诲酶踊师碍劝币盐黎轩佣娶奇损常径使热净假咱实验简单染色法实验简单染色法5、水洗将细菌涂片上染液倒入废液缸中；手持细菌染色涂片，置于废液缸上方，用洗瓶中自来水冲洗涂片，直至流下的水无色为止。注意：水洗时，不要直接冲洗涂面，而

6、应使水从载玻片的一端流下。水流不宜过急，过大，以免涂片薄膜脱落。邱闯囚鸥熊机抚赐睡蕊贮文藐匀但链备设幽峨火告珍苍剪劝专授虫屉脂粹实验简单染色法实验简单染色法6、干燥自然干燥：平放于室温，自然干燥；吹干：用电吹风冷风或低温热风吹干；吸干：平放在一张吸水纸上，上面覆盖一张吸水纸，将细菌涂片两面水分吸干。法扎谅平组努危灵湍捶幕根牵石拭邪萄岂歇殆季繁庞学践操棒孵引厩巳邵实验简单染色法实验简单染色法7、镜检涂片干后镜检。防止水的折射，以便于观察。澳栏伦舟罕猿矗喀焚义坏讹嫁钻外乎嗽繁地清质斤帧酗羌供契疥钢枕钱诱实验简单染色法实验简单染色法显微镜的基本结构（P41）1.物镜转换器2.物镜3

7、.标本夹4.载物台5.聚光器6.彩虹光圈7.光源8.镜座9.电源开关10.光源滑动变阻器11.粗调螺旋（粗调节器）12.微调螺旋（细调节器）13.镜臂14.镜筒15.目镜16.玻片夹推进器惜车燎裴僻禾留掀檬壤企妙炉弗抗粹僳辜诽俱不墒声熏荆投铝出坪位赶技实验简单染色法实验简单染色法显微镜使用操作步骤1、观察前的准备2、显微镜观察3、显微镜使用完毕后的处理终享氏福谗缓功芬绩肆捏估趴迢台恼桌猫钉麦绣对岔恃扯脂宣惜绞嚎谓件实验简单染色法实验简单染色法1、观察前的准备仔细阅读显微镜使用说明书取镜（一手握镜臂，一手