MCPH1增强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制.pdf

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1、李韵等MCPH1增强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制第9期·1169·doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2014.09.005MCPH1增强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制①李韵麦力张冀马冬梅李海玉樊建军宋方洲(重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016)中图分类号R737.33文献标志码A文章编号1000-484X(2014)09-1169-05[摘要]目的:研究MCPH1加强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制。方法:将慢病毒转染并筛选好的MCPH1过表达组caski+,和对照组caski一,分别用顺铂(cisplati

2、n)处理,MTT法检测生长抑制效率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Real—timePCR检测相关基因Bax、Caspase-3和P53mRNA表达。结果:caski+cddp+组的生长抑制作用比caski—cddp+相更强,并呈时效和量效关系;DAPI染色形态学显示caski+cddp+组凋亡小体增多,可见致密强荧光;流式细胞仪检测凋亡率结果为caski+cddp+组凋亡率比caski—cddp+组高13.21%,其中晚期凋亡更明显,caski+cddp+组比caski—cddp+组高17.16%;Rea1.timePCR检测基因Bax、Caspase一3的mR

3、NA水平,caski+cddp+组比caski-cddp+组分别高出2倍和77%,caski+cddp+组抑癌基因P53的mRNA水平也有上升。结论:MCPH1能增强宫颈癌caski细胞对顺铂的敏感性,为MCPH1的进一步研究和宫颈癌的化疗耐药性研究奠定了基础。[关键词]MCPH1;宫颈癌;顺铂;敏感性EffectandmechanismofMCPH1onenhancingcisplatinchemosensitivityincervicalcancercaskicellLIYun,MAILi,ZHANGJi,MADong—Mei,LIHal—Yu,FANJian—Jun,SONGFang

4、—Zhou.MolecularMedicineandCancerResearchCenter,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China[Abstract]Objective:TostudytheefectandmechanismofMCPH1onenhancingcisplatinchemosensitivityincervicalcancercaskicel1.Methods:CisplatinactedonMCPH1overexpressiongroupcaski+cellwhichwastransfectedwithlentiv

5、iralandfiltered,andcontrolgroupcaski—cell,respectively.Thecell—growthinhibitionwasmeasuredbyMTI"assay.ApoptoticmorphologywasanalyzedwithDAPI.Apoptosisratewasdetectedbyflowcytometry.ThemRNAexpressionsofrelatedgenes,suchasBax,Caspase。3andP53,werequantifiedbyRea1.timePCR.Results:Growthinhibitionofgro

6、upcaski+cddp+wasmoreobviousthangroupcaski—cddp+inatime.anddose—dependantmanner.DAPIstainingmorphologydisplayedthat,caski+cddp+grouphadmoreapoptoticbodiesanddensestrongfluorescence.Theapoptosisratedetectedbyflowcytometryofgroupcaski+cddp+was13.21%higherthangroupcaski—cddp+.Amongthem,latestageapopto

7、sisofgroupcaski+cddp+wasmoreobvious,groupcaski+cddp+was17.16%higherthangroupcaski—cddp+ThemRNAexpressionsquantifiedbyReal—timePCRofBaxandCaspase一3ingroupcaski+cddp+wastwiceand77%higherthangroupcaski—cddp+respecti

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