猪伪狂犬病毒湖北株gE基因的克隆与序列分析.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiA．Sci．2014，42(25)：8502—8503，8515责任编辑李占东责任校对李岩猪伪狂犬病毒湖北株gE基因的克隆与序列分析郭锐一，田永祥，，周丹娜，段正赢，杨克礼，裴小英，王红4，廖仁芳，罗咏梅，刘心建(1．湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，湖北武汉430064；2．动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉430064；3．武汉市动物卫生监督所，湖北武汉430061；4．山东安池集团，山东济南250100；5．荆门市畜牧兽医局，湖北荆f-I448000；6．襄阳市动物卫

2、生监督所，湖北襄阳442110；7．江夏区动物疫病预防控制中心，湖北武汉430200)摘要[目的]通过对从湖北省某猪场分离获得的伪狂犬病毒的gE基因克隆和测序，分析其遗传变化规律。[方法]参考GenBank中猪伪狂犬痛病毒(PorcinepseudorabiesVirus，PRV)gE基因的序列设计1对引物，对PRlV湖北株gE基因进行PCR扩增和序列分析，PCR产物克隆到pMD18一T载体。对重组质粒进行限制性内切酶分析和基因测序，与GenBank收录的国内外其他地区的标准参考毒株进行同源性分析和比较。[结果]与标准参考毒株

3、的核苷酸序列同源性为95．0％一98．0％，进化树分析表明，PRVHBXS2014株与河南焦作株EU561349．China同属于一个分支，亲缘关系较近，但存在个别位点的基因突变。[结论]为有效防控该病提供参考。关键词猪伪狂犬病毒；gE基因；PCR扩增；克隆；序列分析中图分类号S188文献标识码A文章编号0517—6611(2014)~5—08502—02CloningofHubeiStrain啦GeneofPorcinePseudorabiesVirusandSequenceAnalysisGU0Rui，11ANYong·x

4、iangetal(InstituteofAnimalHusbandryandVeterinary，HubeiAcademyofAculturalScience，Wuhan，Hubei4300l64；HubeiKeyLaboratoryofAnimalEmbryoEngineeringandMolecularBreeding，Wuhan，Hubei430o64)Abstract[Objective]BasedoncloningandsequencingofHubeistraingEgeneofporcinepseudorabie

5、svirusisolatedfromapigfarmsinHu—beiProvince，theirgeneticvariationwasanalyzed．[Method]ApairsofprimersweredesignedandthesequenceofgEgeneofpseudorabiesvirusinthereferenceGenBank．PCRamplificationandsequenceanalysisofPRVHubeistraingEgenewasdone．andthePCRproductwasclonedi

6、ntopMD18一Tvector．Byrestrictionenzymeanalysisandsequencingofrecombinantplasmid，homologyanalysisandcomparisonwiththeotherregionsincludedinGenBankstandardreferencestrainsathomeandabroad．1ResultITheresultsshowedthatwiththestandardreferencestrains．thenu．cleotidesequenceh

7、omologyof95．0％一98．0％．phylogenetictreeanalysisshowedtllat，PRVHBXs2014strainandJiaozuoEU561349一ChinainHenanstrainbelongedtothesamebranch。closerelationship，buttherearesomegenemutation，andtheresultswereconsistentwiththereportedintheliterature．『Conclusion1Thestudyprovide

8、dareferenceforeffectivepreventionmadcontrolofthedisease．KeywordsPorcinepseudorabiesvirus；gEgene；PCRamplification；Cloning；Sequenceanalysis伪