化学发光介绍.ppt

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1、化学发光介绍二零零九年元月化学发光免疫分析方法简介化学发光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛，已占各种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取代者。化学发光免疫测定是目前世界公认先进的标记免疫测定技术，化学发光免疫分析

2、技术具有高度的准确性和特异性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。化学发光是一种特异的化学反应，有机分子吸收化学能后发生能级跃迁，产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体，当其返回到基态而发出光子，即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术，即为化学发光免疫分析。化学发光的发光类型通常分为闪光型（flashtype）和辉光型（glowtyp

3、e）两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。北京泰格科信的化学发光免疫分析诊断试剂发光类型为辉光型。化学发光免疫分析的优势灵敏度高灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度可达10-22mol/L（RIA为10-12mol/L）。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质，对疾病的早期

4、诊断具有十分重要的意义。宽的线性动力学范围发光强度在4～6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（OD值）为2.0的范围相比，优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围，但放射性限制了其应用。光信号持续时间长辉光型的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。分析方法简便快速绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。结果稳定、误差小样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给

5、分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。安全性好及使用期长免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保存期可达一年。目前化学发光开展的项目1、乙肝两对半（表面抗原、表面抗体、E抗原、E抗体、核心抗体）6、肝纤维化检测（HA,LN,PCIII,CIV,FN）2、肿瘤标志物（AFP,CEA,PSA,FPSA,FER,CA199,CA125,CA153,B-2MG…）7、不育不孕类（AOA,AEA,ASA,ATB.ACA.ZB,HCG）3、性激素系列（LH,FSH,TSH,E2,PRO

6、,PRL,TES,HCG,B-HCG…）8、优生优育类（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）4、甲状腺功能（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…）9、其他类（ALB,一些药物测试等）5、糖尿病系列（C肽，INS,INS-AB,GAD,PINS,ICA…）10、不断发展中的其他临床检测项目。。。为什么要开展乙肝“两对半”定量检测乙型病毒性肝炎是世界性的传染病，严重地威胁着人类的健康。我国是乙型病毒性肝炎高发病国家。据统计全世界无症状携带者（HBsAg携带者）超过2.8亿，

7、我国占1亿以上，且多数无症状。所以乙肝的早期诊断对控制传染源、降低发病率及疾病的治疗均具有很重要的意义。酶标（ELISA）检测始于20世纪80年代中期，它对乙肝“两对半”定性测定在疾病的诊断，病情监测，疗效观察起到了一定的作用，但酶标检测HbsAg灵敏度较低，不能真正意义上定量测定血清中HbsAg含量。随着临床医学的发展，定性检测已经远远不能满足临床及患者的要求。化学发光免疫分析定量测定乙肝“两对半”大大弥补了酶标定性测定及灵敏度低的不足。一、化学发光极大地提高了检测灵敏度HBsAg是HBV感染的特

8、异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊断，绝大多数HBV感染者外周血可出现HBsAg。化学发光免疫分析检测HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml，而酶标（EIASA）检测的灵敏度为2ng/ml，放射免疫（RIA）灵敏度为1ng/ml，化学发光免疫分析极大地提高检测的灵敏度。因此，在急性乙肝早期化学发光免疫分析检测能及早检出HBsAg，缩短窗口期的时间，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性；其次，可发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对