分离度计算因子.doc

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1、1.改变n和H这两个参数首先与柱长L有关，L增大时，n就成比例地增加，但分析时间也增加。理想的方法是在不增加柱长的条件下减小H以达到增加u的目的。可采取的措施有采用接近uopt的载气流速，采用小内径的色谱柱，如果是填充柱就采用较小的填料粒度。2.改变k改变k是提高分离度R的最容易的方法。图5-16所示为k与R以及分析时间的关系，可见，k在一定范围内增加可有效地提高分离度，但当k大于5时R的变化就很小了，反而使保留时间迅速增加。所以，GC分析中K值最好控制在2-5之间，一般要求不超过10，否则会大大延长分

2、析时间。改变k的最简单的方法是改变柱温，降低柱温可明显地提高k。此外，降低载气流速也是提高k的常用方法。3.改变αα可以看成是一个准热力学参数，在流动相和固定相一定时，它只与柱温有关。当两个组分的α接近1时，改变H和k都难以在可接受的时间内实现完全分离。此时，应在保持k值为2-10之间的前提下，设法改变α。下面是按由易到难顺序排列的几个改变α的方法：①改变柱温；②改变固定相，即更换色谱柱；③利用化学作用，如通过衍生化反应改变待测物的结构4.程序升温毛细管GC可采用程序升温技术来优化分离。因为程序升温可使

3、待测物在适当的温度下流出，以保证每个组分有合适的k值，同时改善分离度，因此是GC分离复杂混合物的有效方法。5.进样和检测条件的优化除了采用适当的进样技术可以在一定程度上改善分离度以外，进样和检测条件的优化主要与灵敏度有关。有关内容请参阅有关内容。综上所述，GC的分离优化就是要在保证分分离度和灵敏度的前提下，实现快速分析。分离度、灵敏度和分析速度都是色谱工作者要追求的东西，但实际操作中，常常遇到鱼和熊掌的问题。如右面的三角形所示：正所谓有得必有失，当我们设法提高分离度的时候，往往不得不牺牲一些分析速度，而

4、采用更复杂的样品制备过程来提高灵敏度，就会以降低分析效率为代价。这就看我们首先注重什么。实际工作中往往是首先满足分离度的要求，然后提高分析灵敏度，最后再考虑尽可能地缩短分析时间。色谱分析中的分离度公式如下：式中α———分离因子；N———色谱柱（或薄层板）的理论板数；k'———容量因子。α，N和k'三个参数是完全独立的，每个参数均可被优化，分别达到最佳值，以使Rs达到最大。在优化α，N和k'，使欲测的痕量组分与干扰组分得到充分分离的同时，还要考虑到要使欲测的痕量组分在洗脱过程中尽量少被稀释，以便检测器能够

5、检测出来，也就是要使欲测的痕量组分具有最大的峰高。为此，在色谱过程中要尽量减小峰的展宽，因为同样面积的峰，如峰宽加大，则峰高降低，峰高降低到某一程度，检测器就无法检测了。在色谱痕量分析中，k'值不能太大，多选在0.5-1.5，以减少欲测痕量组分被稀释，这样就能得到较窄的峰；要选用理论板数高的短柱（短板），这样可以最大限度地增大峰高，而不降低分离度。但是，选用小的k'值和短柱都不利于提高分离度(Rs)），因此增大分离因子α是改进色谱痕量分析准确度的最有效的方法。欲测的痕量组分的峰与干扰组分的峰严重重叠，往

6、往只能通过改变色谱系统的选择性来消除，而不能用增加k'值和加长柱子的方法来消除。为此，在气相色谱中可以通过降低柱温，改变固定相等方法来增大分离因子（α）；在液相色谱中则可以通过改变洗脱液的组成，选择合适的固定相等方法来增大分离因子（!）。对难分离的物质（α趋于1时）对选择性作用的微小增加就会显著地影响峰高。如α值由1.01提高到1.025时，就可以适当减短柱长，保持分离度Rs不变，而峰高可增加2-5倍（k'值不变）。