艾滋病梅毒丙肝的检测及解释.ppt

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1、HIV、TP、HCV的检验及意义HIV实验室检测检测样本HIV抗体酶免--血清/血浆，尿液快速检测--血清/血浆/全血，唾液CD4：抗凝全血病载、基因型、耐药：血浆样本保存抗体检测：短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。筛查阴性样品，建议至少保存1～2个月；筛查阳性样品，无论确证结果如何，均应将剩余的样品保存至少10年核酸检测：血浆4天内进行检测的可存放于4℃，3个月以内应存放于-20℃以下，3个月以上应置于-70℃以下。CD4：室温（18～25℃）保存和运输。要求48小时内染色，染色后6小时内分析

2、；如采血后24小时内染色，可在染色后24小时内分析。HIV抗体检测筛查试验酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）确证试验免疫印迹试验（WB）条带免疫试验放射免疫沉淀试验（RIPA）免疫荧光试验（IFA）初筛和复检流程样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1HIV抗体筛查检测流程确证流程质量控制试剂盒内部对照：按照试剂盒要求设置使用室内质控品：外购、阳性对照/样本稀释ELISA检测20次

3、内—即刻法质控20次后，Levey-Jennings质控图更换试剂厂家必须重新制作质控图，同种试剂不同批号可继续使用（注明批号）发现失控、位移及时查找原因，必要时重新开始质控快速检测更换批号进行质量验证注意反应时间、温度、数量控制设备检定、维护强检设备酶标仪、移液器、高压锅、温度计（可自行比对）自行维护生物安全柜、洗板机、洗眼器、水平（梅毒）旋转仪温度控制冰箱、温箱/水浴箱内放置经检定（比对）的温度计高压灭菌放置指示卡洗眼器定期进行维护SOP文件（1）样品的接收、登记、处理、保存和运输；（2）检测方法和步骤；（3）试剂使用和保存；（

4、4）仪器的使用维护和校准；（5）质量控制要求及程序；（6）结果解释与报告；（7）保密程序；（8）实验室数据、相关文件记录与保存；（9）不确定样品追踪和处理；（10）实验室安全防护及实验室的清理和消毒。实验室记录检测登记表试验原始记录（ELISA、快速、RPR/TURST）报告单/化验单复检化验单—筛查阳性填写，信息收集完整仪器使用、维护保养记录质控资料消毒记录废弃物处理登记冰箱温度记录人员健康档案（体检、疫苗接种记录，化验单、体检报告）实验室生物安全实验室：Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）建立安全制度：S-SOP、意外事故处理预案、

5、信息安全及保密制度培训和管理：全员培训、标准防护原则个人防护：防护用品与设施、健康监护安全操作：样品采集与管理、仪器设备使用、利器使用消费与污物处理梅毒实验室检测技术梅毒螺旋体--梅毒的病原体分类：螺旋体目（Spirochaetales）螺旋体科（Spirochaetaceae）密螺旋体属（Treponema）苍白螺旋体种（Treponemapallidum）分几个亚种梅毒螺旋体（TP）小而纤细的螺旋状微生物长5～20μm，粗细<0.2μm有6～12个规则的螺旋基本结构为一原生质的圆柱体，为两层膜所围绕行动缓慢而有规律-围绕其长轴旋

6、转中前后移动-伸缩其圈间之距离而移动-全身弯曲如蛇行生物学特性-1免疫性：人对TP产生细胞免疫和体液免疫。细胞免疫对感染过程的影响尚不清楚。特异性抗体：TP可导致人体产生多种抗体。其中TP的脂质激发机体产生的特异性抗体，在初次感染后产生，保持终生，但对清除机体内的TP无作用。另一些种特异性抗体可与很多种非致病性螺旋体发生交叉反应。生物学特性-2反应素：TP破坏机体组织，使组织释放一种抗原性心磷脂,以及螺旋体自身的磷脂类物质，可以激发机体产生反应素，能同从动物如牛心肌中提取的心磷脂发生反应，通过试验来检测。反应素水平与梅毒感染过程相平

7、行，抗梅治疗后约半年转阴，但反应素并非感染TP后所特有。生物学特性-3致病性：自然条件下TP只感染人，尚未证明梅毒螺旋体能产生内毒素和外毒素，致病机理尚不清楚。传染性：感染早期传染性最强，随着病程的延长传染性越来越小。临床上未经治疗的病人，在感染后1～2年内最具有传染性，一般认为4年以上几乎不通过性接触传染，但保持对胎儿的传染性。抵抗力：TP在体外仅能存活数小时，40℃时失去传染力，煮沸立即死亡；对干燥特别敏感，一般的消毒剂均能容易将其杀灭。血库的血液和血浆中可存活24小时以上，三日后全部死亡。生存条件厌氧寄生物，在人体内可长期生存

8、，体外不易存活干燥、肥皂水及一般消毒剂如1:1000苯酚、新洁尔灭、酒精均可于短时间将其杀死在血液中4℃经3日可死亡，故在血库冰箱冷藏3日以上的血液就无传染性温度的影响：41-42℃时可生活1-2小时，在48℃仅半小时即失去感染力，1