(四)艾滋病梅毒丙肝检测及结果意义.ppt

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1、艾滋病梅毒丙肝实验室检测及影响结果因素分析内容提要：1.艾滋病检测程序、方法应用和注意事项。2.梅毒检测程序、方法应用和注意事项。3.丙肝检测程序、方法应用和注意事项。4.影响实验室检测结果的因素分析艾滋病检测方法常用HIV病原学检测方法:1.核酸检测（PCR、病毒载量）2.病毒培养分离3.P24抗原检测常用HIV抗体检测方法:初筛：1.酶联免疫吸附法ELISA：第三代、第四代2.快速检测RT：金标、硒标3.简单法PA:明胶颗粒凝集确证：免疫印迹法WB:（WesternBlot）、RIBA其他相关检测方法:免疫功能测定：CD4/CD8检测HIV抗体检测目的1HIV

2、抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。2以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。3以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。4以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。1根据目的选择检测方法及检测策略。2严格遵守实验室SOP。3筛查试验阳性，须作确证试验。4筛查试验阴性，不应做确证试验。5筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。HIV抗体检测的要点样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验原有试剂+另一不同原理（或

3、厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1HIV抗体筛查检测流程HIV抗体筛查检测流程初筛试验1、HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验。2、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗体阴性（-）报告；对呈阳性反应的样品，需要进一步做复检试验和确证试验。复检试验对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。如两种

4、试剂复检均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性（-）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确证实验室进行确证试验。如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1p24抗原或核酸检测，必要时进行随访。确证试验1确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。2确证样品可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。3确证方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。HIV抗体不确定（±）结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期

5、间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。随访期间可根据需要，检测病毒核酸或P24抗原作为辅助诊断。如果出现HIV-2型的特异性指示条带，根据实际情况需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确证试验或HIV-2核酸检测，以进一步明确HIV-2感染状态，疑难样品送国家艾滋病参比实验室进一步分析。HIV-2抗体阳性出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗

6、体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。同时符合以下二条标准，即出现至少2条env带（gp36和gp140/gp105），和试剂盒提供的阳性判定标准，可判为HIV-2抗体阳性。孕产妇新生儿检测艾滋病快速检测试验（RT）是在ELISA基础上发展起来的一种检测技术，它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法进行检测。突出优点为快速、试剂便于保存、检测不需要特殊设备并可以单份检测，比较适用于基层医疗单位和标本初筛。挑战：进一步提高检测灵敏度和特异性，实现检测多元化，进行定

7、量和半定量检测胶体金纸条将会更加广泛地应用于各个领域。快速试剂使用中存在的问题快速检测只是初筛检测，存在较高的假阳性率和假阴性率；技术上属于主观判读，不具备标准化条件；快速检测的质量控制问题目前没有有效方法；价格是常规技术的5倍。行政经费政策不支持，个人支付价位高；存在较大的批间误差，加上不属于政策规定项目，风险较大，基层医疗卫生单位不愿意承担责任。担心敏感性不够高，不敢出阴性报告；HIV-1抗原检测的用途：1HIV-1感染窗口期、HIV抗体不确定或HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。2第四代HIV检测试剂的阳性结果的辅助诊断。3监测病程进展或抗病毒治疗效果。4

8、HIV分离