淀粉的国标测定方法.doc

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1、淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。2.适用范围GB5009.9-85，适用于所有含淀粉的食物。3.仪器（1）回流冷凝器（2）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。（1）乙醚（2）0.5%淀粉酶溶液：称取淀粉酶（Sigma公司，E.C3.2.1.1）0.5g，加100ml水溶解，加入数滴

2、甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好邻用现配。）（3）碘溶液：称取3.6g碘化钾溶于20ml水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀释至100ml。（4）85%乙醇。（5）其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1样品处理称取2～5g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100ml85%乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，

3、将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60℃保温1h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤。（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5ml6mol/L盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基

4、红指示剂，用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。）5.2测定按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。6.计算 　X1=          （A1-A2）×0.9               ×100  

5、……………（1）m1× V1 × V3 ×1000V2100式中：X1--样品中淀粉的含量，%；A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg；A2--试剂空白中还原糖的含量，mg；0.9--还原糖（以葡萄糖计）换算成淀粉的换算系数；m1--称取样品质量，g；V1--水解用样品溶液体积，ml；V2--样品定容总体积，ml；V3--测定用样品处理液的体积，ml。二、酸水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，折算成淀粉。2.适用范围本法适用于含淀粉的食物3.仪器（

6、1）水浴锅。（2）高速组织捣碎机：1200rpm。（3）皂化装置并附250ml锥形瓶。4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。（1）乙醚。（2）85%乙醇溶液。（3）6mol/L盐酸溶液。（4）10mol/L氢氧化钠溶液。（5）2.5mol/L氢氧化钠溶液。（6）甲基红指示液：0.2%乙醇溶液。（7）精密pH试纸。（8）20%乙酸铅溶液，（9）10%硫酸钠溶液。（10）其余试剂同还原糖的测定。5.操作方法5.1样品处理5.1.1粮食、豆类、糕点、饼干等较干燥的样品：称取2.0～5.0g磨碎过40

7、目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去样品中脂肪，弃去乙醚。再用150ml85%乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以100ml水洗涤漏斗中残渣并转移至250ml锥形瓶中，加入30ml6mol/L盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解冷却后，加入2滴甲基红指示剂，先以40%氢氧化钠溶液调至黄色，再以6mol/L盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密pH试纸测试，使样品水解液的pH约为7。然后加20ml20

8、%乙酸铅溶液，摇匀，放置10min。再加20ml10%硫酸钠溶液，以除去过量的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500ml容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20ml，滤液供测定用。5.1.2蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品：按1：1加水在组织捣碎机种捣成匀浆（蔬菜、水果需先洗净、凉干，取可食部分）。称取5～10g匀浆（液体样品可直接量取），于250ml锥形瓶中