哈工大酶工程试题(A)答案.doc

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1、酶工程试题(A)年级2001专业生物技术一名词解释(每题3分,共计30分)1.酶工程2.自杀性底物3.别构酶4.诱导酶5.Mol催化活性6.离子交换层析7.固定化酶8.修饰酶9.非水酶学10.模拟酶二填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是,二是。2.求Km最常用的方法是。3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是,另一类是。4.可逆抑制作用可分为,,,。5.对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是,二是能够利用廉价原料,发酵周期,产酶量,三是菌种不易,四是最好选用能产

2、生酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。7.酶制剂有四种类型即酶制剂,酶制剂,酶制剂和酶制剂。8.通常酶的固定化方法有法,法,法,法。9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。10.模拟酶的两种类型是酶和酶。11.抗体酶的制备方法有法和法。三问答题(每题10分,共计40分)1.固定化酶和游离酶相比,有何优缺点?2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法,并简述其原理。3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料?4.下面是某人对酶测定的一些数据,据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。[S](mol/

3、L)V0(umol/min)0.5´10-6284.0´10-6401.0´10-5702.0´10-5954.0´10-51121.0´10-41282.0´10-41391.0´10-2140酶工程试题(B)一名词解释1.抗体酶2.酶反应器3.模拟酶4.产物抑制5.稳定pH6.产酶动力学7.凝胶过滤8.固定化酶9.非水酶学10.液体发酵法二填空题(每空1分,共计30分)1.Km值增加,其抑制剂属于抑制剂,Km不变,其抑制剂属于抑制剂,Km减小,其抑制剂属于抑制剂。2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。3.菌种的优劣

4、是影响产酶发酵的主要因素,除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响,发酵条件一般包括,,,,和等。4.打破酶合成调节机制限制的方有,,。5.酶生物合成的模式分是,,,。6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法,法和法7.通常酶的固定化方法有法,法,法,法。8.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的,从而降低了底物分子的,而抗体结合的抗原只是一个态分子,所以没有催化能力三问答题(每题10分,共计40分)1.在生产实践中,对产酶菌有何要求?2.对酶进行化学修饰时,应

5、考虑哪些因素?3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团4.某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据,试计算比活力,回收率及纯化倍数。体积(ml)活力单位(u/ml)蛋白氮(mg/ml)初提取液1202002.5硫酸铵沉淀58101.5(A)答案及评分细则一1.酶工程:又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术。2.自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种底物叫自杀性底物。3.别构酶;调节物与酶分子的调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从

6、而改变催化中心对底物的亲和力,这种影响被称为别构效应,具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶1.Mol催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析:利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方法叫离子交换层析。7.固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化

7、作用的酶8.修饰酶:在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学1.模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。二1.酶分子结构反应条件2.双倒数作图法3.序列机制乒乓机制1.竞争性反竞争性非竞争性混合性2.致病菌短高退化胞外3.终止反应法连续反应法4.液体酶制剂固体酶制剂纯酶制剂固定化酶制剂5.吸附法共价键结合法交联法包埋法6.半合成酶全合成酶7.拷贝法引入法三1优点(1

8、)易将固定化酶和底物,产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺(2)可以在较长的时间内连续使用(3)反应过程可以严格控制,有利于工艺自动化(4)提高了酶的稳定性(5)较能适于多酶反应(6)酶的使用效率高产率高成本低缺点(1)固定化时酶的活力有损失(2)比较适应于水溶性底物(3)与完整的

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