实验动物眼底照相及荧光素眼底血管造影.ppt

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1、实验动物眼底照相及荧光素眼底血管造影昭衍（苏州）新药研究中心眼科实验室-------眼科基础知识可获取眼底彩照及FFA的仪器台式裂隙灯+前置镜台式眼底照相机手持式眼底照相机动物眼底结构-猴视网膜颞上动脉视网膜颞上静脉视网膜鼻上动脉视网膜鼻上静脉视网膜鼻下动脉视网膜颞下动脉视网膜颞下静脉黄斑中心凹黄斑反光晕轮视盘食蟹猴眼底图谱手持式眼底照相数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心动物眼底结构-猴正常眼底图A：神经纤维反光B：豹纹状眼底C：豹纹状眼底ACB视盘视网膜静脉视网膜动脉动物眼底结构-兔新西兰兔眼底图谱兔：视盘

2、位于上方，主要动静脉从视盘中央进入眼内分为内侧支和鼻侧支，动脉位于表层，静脉位于深层，动静脉平行或彼此交叉。脉络膜血管手持式眼底照相加+60D前置镜手持式眼底照相动物眼底结构-狗黄绿色透明毯层深色素层鼻下支动脉鼻下支静脉脉上支静脉上支动脉颞下支动静脉Beagle犬眼底图谱视盘视网膜静脉视网膜动脉鼠：视盘位于视网膜中央，色淡红，无明显黄斑结构，视网膜血管为全血管型，中央动脉与中央静脉相间排列。动物眼底结构-鼠SD大鼠眼底图谱BN大鼠眼底图谱视盘视网膜静脉视网膜动脉脉络膜血管数据来源：昭衍（苏州）新药研究中心AA：视网膜色素紊乱、色素上皮萎缩紊乱

3、B：视网膜色素紊乱C:黄斑中心凹颞侧见2个黄白色病灶，未见明显出血。BC眼底异常图片荧光素眼底血管造影一、原理：荧光素眼底血管造影（fundusfluoresceninangiography,FFA）最基本的原理是利用能发荧光的物质，用特定波长的光线激发，产生可以观察到得图像，激发停止，荧光就消失。FFA采用的荧光染料是荧光素钠，造影时将其快速注入静脉内，用蓝色光照射，使眼底血管内的荧光素钠被激发出荧光，用高速照相及或摄像机进行拍摄或录像，了解实时的眼底情况。荧光素眼底血管造影栅滤光片激发滤光片眼光源照相机闪光灯465—490nm500—53

4、0nm荧光素眼底血管造影荧光素眼底血管造影关于荧光素钠1.荧光素钠药理荧光素钠（sodiumfluorescein）：分子量为376.27，pH=8时荧光最强。激发光波长在紫蓝色波段（465—490nm），激发发出的荧光波长在黄绿色波段（500—530nm）分布：60%--80%的荧光素钠在血液中与白蛋白结合不能发出荧光，大约20%游离在血液中可被蓝光激发出荧光。静脉注射后1min，荧光素钠即散布全身组织。排泄：24h内经肝、肾排出。注射后2—4h皮肤显黄色，2天内尿液呈黄色。多饮水可加速荧光素钠排出。2.荧光素钠的应用荧光素钠一般经静脉注射

5、，少数情况可口服给药。(目前我们使用的是10%荧光素钠，0.08ml/kg）3.荧光素钠的副作用二、荧光造影眼底血管造影技术操作1.造影前准备确认仪器能正常使用动物的精神状态（特别是进行过）医疗垃圾袋、生理盐水，开睑器2.造影过程过敏试验：目前试验中动物未进行过敏试验。造影：先拍摄彩色眼底像，应尽量包括全部眼底，突出病变部位。注射荧光素钠，食蟹猴一般使用10%荧光素钠，0.08ml/kg。注射完毕开始计时并开始拍片，前30s连续拍片，每秒1-2张，30s后可每5秒一张。如果双眼病变需要双眼同时造影。造影早期尽量多照一些图像，中晚期一边观察一边

6、拍摄，注意细节。荧光素眼底血管造影三、眼底荧光造影所见的正常荧光形态内界膜ILM神经纤维层NFL神经节细胞层GCL内丛状层IPL内颗粒层INL外丛状层OPL外颗粒层ONL外界膜OLM感光细胞层IS/OS色素上皮层RPE视网膜分层荧光素眼底血管造影眼底组织的屏障功能血-视网膜屏障：血管内皮细胞紧密连接+壁内周细胞组成屏障，其他血管没有此屏蔽功能。脉络膜—视网膜屏障：RPE间闭锁小带色素上皮细胞玻璃膜脉络膜毛细血管闭锁小带荧光素眼底血管造影臂-视网膜循环时间（arm-retinacirculationtime，A-RCT）荧光素：肘中静脉→右心→

7、肺循环→主动脉→颈总动脉→颈内动脉→眼动脉→眼底A-RCT大体在10～15s影响A-RCT的各种因素注射部位、速度、注射处的血管粗细、血液粘度与速度、心脏的排血功能，血管管径和阻力，燃料浓度与剂量。甲亢和贫血可使染料加速到眼底而红细胞增多症和心排量减低等反之。颈动脉狭窄等荧光素眼底血管造影视网膜循环的荧光形态及分期层流与轴流现象荧光素的血液前锋呈分层流动，称为层流。遇到分支后，荧光素沿一侧前进，称为层流。动脉层流荧光素眼底血管造影静脉层流染料排空静脉：周边充盈→全部充盈→周边排空→全部排空动脉：中央充盈→全部充盈→中央排空→全部排空染料可以再

8、循环2-3次。五六分钟后荧光素均匀分布于周身所有血液内，此时就见不到再循环了。荧光素眼底血管造影背景荧光与残余荧光背景荧光：在动脉前期脉络膜毛细血管很快充盈并融合形