斐林试剂与双缩脲试剂有何区别.ppt

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1、生物学基本实验高二第一学期实验复习一、考纲要求:1、理解所学实验的内容,包括实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能。2、具备验证相关生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。3、能对一些生物学问题进行初步的探究性研究。二、考试范围:实验1、书P17-19生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验2、书P30-31高倍显微镜的使用和观察叶绿体和细胞质的流动实验3、书P39-40观察植物细胞的有丝分裂实验4、书P46比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率实验5、书P47探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验6

2、、书P53-54叶绿体中色素的提取和分离实验7、书P59-60观察植物细胞的质壁分离和复原实验8、书P79-80植物向性运动的实验设计和观察实验9、书P84设计实验,观察生长素或生长素类似物对植物生长            发育的影响实验10、书P87-88动物饲喂小动物的实验(选做)实验11、书P101观察被子植物的花粉管实验12、补做:温度及pH对酶活性的影响实验复习方法概述:1、熟记基本的实验操作方法、基本实验仪器的使用要点和基本实验试剂的用途。2、明确科学研究的方法、原则和一般程序3、掌握实验设计的基本原则。4、明确实验

3、设计的一般程序:(了解题目的要求)、明确实验目的、分析实验原理、确定实验思路、选择实验器材、设计实验步骤、预测结果与分析5、将每一章节的相关实验进行实验设计方面的分析四.复习重点:1、实验设计中的注意要点2、实验设计的过程3、实验分析思路五.学习难点:1、实验设计的合理性和科学性2、实验结果的分析一、物质的鉴定实验生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(实验1)(一)糖类物质的鉴定1.还原性糖的鉴定还原性糖与非还原性糖:还原性糖:有还原性基团——游离醛基或酮基的糖;如          、乳糖、纤维二糖。非还原性糖:    

4、        。鉴定还原糖的试剂:斐林试剂:由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的CuO2沉淀,而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。溶液的颜色变化过程为:浅蓝色—棕色—砖红色(沉淀)。葡萄糖、果糖、麦芽糖淀粉、纤维素、蔗糖、糖元鉴定可溶性还原糖的实验材料为什么不用双子叶植物叶?双子叶植物中,光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉,暂时储藏在叶子内,因此最好不用双子叶植物的叶

5、子作实验材料。为什么不用单子叶植物叶?有些单子叶植物,如韭菜、鸢尾,并不将光合作用的初始产物转变为淀粉,因此叶内含有大量的可溶性单糖,但是,由于叶片中叶绿素的颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显,因此,也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,或近于白色的,如:苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2.鉴定葡萄糖的方法尿糖试纸、血糖快速检测仪的原理:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖形成葡萄糖酸、过氧化

6、氢;过氧化氢分解产生氧气,使指示剂显示不同的颜色。3.鉴定淀粉的方法碘—碘化钾溶液(二)脂肪的鉴定1.苏丹III或苏丹IV染色时间脂肪滴颜色橘黄色红色2~3分钟1分钟苏丹III苏丹IV2.鉴定脂肪的实验材料最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。3、脂肪鉴定的实验步骤:取材-制片-观察-结论取材:将子叶削成薄片制片:a:取理想的薄片b:染色c:去浮色d:制成临时装片观察:先低后高结论:实验关键:子叶应切成薄片(三)蛋白质(多肽、二肽)的鉴定1.斐林试剂与双缩脲试剂有何区别?呈紫红色呈砖红色颜色反应先加A液,与样液混匀后滴

7、加B液现配现用;混合均匀;隔水加热;使用方法双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应Cu(OH)2被还原为砖红色的Cu2O发生的反应0.1g/mL的氢氧化钠溶液(A液)0.01g/mL的硫酸铜溶液(B液)0.1g/mL的氢氧化钠溶液0.05g/mL的硫酸铜溶液成分鉴定蛋白质、二肽及多肽鉴定可溶性还原糖的存在;用途双缩脲试剂斐林试剂2.鉴定蛋白质的实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。3.探究课题(1).《果

8、实成熟前后营养成分的变化》多糖变成单糖,还原性糖增加;蛋白质是增加还是减少?(2).《种子萌发过程中营养成分的变化》还原糖、蛋白质、脂肪的含量变化;要解决如何定量的问题,比色的方法。二:叶绿体中色素的提取和分离(实验6)1.实验原理:提取:研磨——二氧化硅:碳酸

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