高中生物 第1章 无菌操作技术实践 第1节 微生物的分离和培养学案 苏教版选修1.doc

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1、第一节　微生物的分离和培养1．简述高压蒸汽灭菌锅的使用方法及注意事项。(重点)2．掌握制备细菌培养基的方法。(重点)3．学会利用无菌操作技术接种与培养大肠杆菌。(难点)培养基及接种操作一、高压蒸汽灭菌锅1．实验室常采用的灭菌方法实验室常利用高温处理达到灭菌效果，包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。2．高压蒸汽灭菌锅的使用使用步骤包括：加水―→装锅―→加热排气―→保温保压―→出锅等。二、配制培养基1．培养基的概念为人工培养微生物而制备的，适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。2．培养基的类型(1)天然培养基(2)合成培养基3．培养基的成分各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无

2、机盐等最基本的物质。三、接种微生物1．接种的概念指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。2．不同接种工具的使用(1)穿刺接种要用接种针。(2)斜面划线接种或平板划线接种要用到接种环。(3)涂布平板接种要用到玻璃刮铲。[合作探讨]探讨1：高压蒸汽灭菌锅是依赖高压灭菌吗？提示：不是，是通过高压来提高湿热的温度灭菌的。探讨2：在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗？为什么？提示：不能。微生物不能分解琼脂。探讨3：为什么要对培养基、接种环、实验空间、一些液体等进行消毒或灭菌处理？提示：培养某种微生物的目的是获得数量较多的、单一的该种微生物，如果不进行消毒或灭菌，则会出现其他一些杂菌，影响微生

3、物的纯度。[思维升华]1．消毒与灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体上绝大多数微生物(包括病原微生物和有害微生物的营养细胞)煮沸消毒法(如100℃下5～6min可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢)、巴氏消毒法、化学药剂消毒法灭菌强烈的物理或化学方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌2.培养基的成分营养物质定义作用主要来源碳源能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机化合物：CO2、NaHCO3等；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以

4、及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等特殊营养物质(生长因子)生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养细菌的能源，酶的激活剂3.培养基类型的划分用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高

5、浓度食盐)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈现黑色，并带有金属光泽)1．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法可分别用于杀灭哪些部位的杂菌(　　)【导学号：】A．接种针、手、培养基　B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅【解析】　培养基通常用高压蒸汽灭菌，常用酒精擦拭对手进行消毒，接种环、接种针等用火焰灼烧的方法进行灭菌。【答案】　C2．下表是某微生物培养基成分，请据此回答：编号①②③④⑤⑥⑦成分粉状硫(

6、NH4)2SO4K2HPO4MgSO4FeSO4CaCl2H2O含量10g0.4g4.0g9.25g0.5g0.5g100mL(1)上表培养基可培养的微生物类型是________。(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中，如不想浪费此培养基，可再加入________，用于培养____________________。(3)若除去成分②，加入(CH2O)，该培养基可用于培养______________。(4)表中营养成分共有________类。(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是_________。(6)上表中各成分质量确定的原则是______________________

7、__。(7)若上表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是____________。【解析】　题表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。若该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可判断培养的微生物是自养型微生物。若该培养基中加入了过量食盐，就可以培养耐盐的金黄色葡萄球菌，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基还需要加入有机碳源。该培养基若加入(CH2O)，