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1、甲基红的解离平衡常数的测定2021/7/29一、目的要求掌握723PC分光光度计和pHS-10A型pH计的原理与使用方法测定甲基红的解离常数2021/7/29二、实验原理甲基红的分子式：，简写成HMR;具有酸(HMR)与碱式(MR-)两种形式，在碱性溶液中呈黄色，酸性溶液中呈红色，在酸性溶液中以两种形式存在：HMRH++MR-解离平衡常数：2021/7/29二、实验原理C(MR-)/c(HMR)的比值用分光光度法测定计算式中：Ａ1、A2—分别为HMR和MR-的最大吸收波长处所测得的总的吸光度；k1,HMR、k1,MR-、k2,HMR、K2,MR
2、-分别为HMR和MR-在最大波长λ1、λ2处的摩尔吸收系数。各物质的摩尔吸收系数值可由作图法求得。分别配制pH=2的各种浓度的甲基红酸性溶液，在波长λ1分别测定各浓度的吸光度，然后对浓度作图得到一条通过原点的直线，由直线的斜率可以计算k1,HMR值，其余各摩尔吸收系数的求法相似。2021/7/29三、主要仪器与试剂723PC分光光度计１台，pHS-10A型pH计１台容量瓶(50mL2只,25mL8只)移液管(5mL、10mL、25mL各１只)甲基红溶液：0.1g晶体甲基红溶于50mL95%的乙醇中，用蒸馏水稀释至200mL20％乙酸钠，0.2m
3、ol.L-1乙酸，0.1mol.L-1HCl，2mol.L-1HCl2021/7/29四、仪器操作方法“方式设定”键(MOED):用于设置测式方式，透射比方式；吸光度方式和浓度直读方式。使用功能键，根据提示将标样的浓度值或因子输入仪器。2021/7/29四、仪器操作方法“100%/0ABS”键：用于自动调节100%T(100%透射比)或0ABS(零吸光度);当波长改变时，一定要调整100%或0ABS。2021/7/29四、仪器操作方法“0%”键：用于自动调整０％透射比。仪器开机后自检的过程中已经将０％的参数保存在微处理器中，一般情况下无需使用此
4、键；仪器长时间使用，需要调整０％透射比。工“波长设定”键(Δ):用于设置分析波长。2021/7/29四、仪器操作方法“功能”键(FUNC)：输入已知标准样的浓度值，按功能键一次；输入已知标准样品Ｋ因子，按功能键二次。2021/7/29四、仪器操作方法１打开仪器电源开关，使仪器预热20分钟。仪器通电后，进入自检状态，自检结束后波长自动停在560nm处，测量方式自动设定在透射比方式（％Ｔ），并自动调100%和0%T。２按“方式键(MODE)将测式方式设置为吸光度方式。透射比方式，显示器显示“XXXnm,XXX.XT”吸光度方式，显示器显示“XXXn
5、m,X.XXXAbs”。３按“波长设置”键(Δ):设置所需要的波长，如340nm４将参比溶液与被测溶液分别倒入比色皿中，用镜头纸将比色皿擦拭干净，光学面保持透明状态．５打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色槽中，盖上样品盖；将参比溶液推入光路中，按“100%Ｔ”键调整零ＡＢＳ。７将被测溶液推入光路中，此时显示器显示是被测样品的吸光度。若仪器要与计算机连接，先打开仪器，再打开计算机，打开光谱应用软件，点击连接按钮即可。2021/7/29五、实验主要操作步骤１.按前面介绍的方法开启分光光度计，并与计算机连接好，使其处于工作状态。２.测定甲基红
6、酸式(HMR)和碱式(MR-)的最大吸收波长Ａ液：取0.50mL甲基红储备液于50mL容量瓶中，加入5mL0.1mol.L-1HCl溶液，用蒸馏水稀释至刻度，溶液的pH大约为２，甲基红以酸式ＨＭＲ存在。B液：取1.00mL甲基红标准溶液于50mL容量瓶中，加入1mL20%NaHAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，溶液的pH大约为8，甲基红以酸式ＭＲ-1存在。测定上述两种甲基红总浓度相等的溶液的在350-600nm之间吸光度随波长的变化，找出最大吸收波长λ１、λ２。2021/7/29五、实验主要操作步骤２.检验HMR和MR-是否符合朗伯－比耳定律，并测
7、定它们在λ１、λ２下的吸收波系数取五只50ml容量瓶，分别加入甲基红溶液0.10ml,0.15ml,0.20ml,0.30ml,0.40ml,再加入1ml0.2mol.L-1HCl溶液。另取五只50ml容量瓶，加入甲基红溶液0.40ml,0.60ml,0.80ml,1.00ml,1.20ml,再加入1ml20%乙酸钠溶液配制一系列待测液，分别稀释至刻度。在波长λ１、λ２下测定这些溶液及原液的吸光度。由吸光度对浓度作图，计算在λ１下甲基红酸式(HMR)和碱式(MR-)的摩尔吸收系数及其他的摩尔吸收系数。2021/7/29五、实验主要操作步骤３.计
8、算不同pH(HMR)和(MR-)的相对量取四只50mL的容量瓶分别加入0.60mL甲基红溶液和1.00mL20%乙酸钠溶液再分别加入5.00mL，2.
