紫外可见分光光度法课件.ppt

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2、们合作的基础，双赢是我们共同的目标！”我愿与XX文化一起发展，一起创造辉煌的明天！第九章紫外、可见分光光度法§1紫外、可见分光光度法的基本概念和原理§2朗伯－比尔定律§3紫外－－可见分光光度计及其应用§9－1　吸光光度法的基本原理组成物质的分子或原子具有选择吸收电磁波的特征，当电磁波照射时，物质中的分子或原子将吸收一定波长的电磁波而产生相应的吸收光谱。吸收光谱的特征与分子或原子的内部结构有关，因此研究物质对电磁波的吸收特征，可以获得物质内部结构的重要信息。一、吸光光度法的特点A灵敏度高测定物质的微量组分（0.01%－－1%），也可测

3、定痕量组分的含量。B准确度较高吸光光度法的相对误差为2%~5%，采用精密的分光光度计测量，相对误差为1%~2%，其准确度虽不如滴定分析法高，但已满足微量组分测定的准确度要求。C简便、快速吸光光度法所使用的仪器——分光光度计，操作简单，易于掌握。分析的基本步骤：将样品处理成溶液、显色、测定。D应用广泛几乎所有的无机物离子和许多有机化合物都可直接或间接地用吸光光度法进行测定。吸光光度法已广泛用于工农业生产和生物、医学、临床、环保等科研部门。二、物质对光的选择性吸收变化的电磁场在空间以一定速度传播的过程，称为电磁波。单色光：只具有一种波长

4、的光。混合光：由两种以上波长组成的光，如白光。白光青蓝青绿黄橙红紫蓝光的互补性与物质的颜色1　光谱法测定分子结构的原理：物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的，物质的颜色由透过光的波长决定。例：硫酸铜溶液吸收白光中的黄色光而呈蓝色；高锰酸钾溶液因吸白光中的绿色光而呈紫色。如果两种适当颜色的光按一定的强度比例混合可以得白光，这两种光就叫互为补色光。物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。/nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560

5、-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-760红蓝绿不同颜色的可见光波长及其互补光白光青蓝青绿黄橙红紫蓝2.测定原理：◆电磁波是能量的一种形式，每一波长的电磁波都具有一定的能量，波长愈短、能量愈高。被测物质的分子对光的吸收具有选择性。3、吸收光谱及其表示方法吸收曲线：将不同波长的单色光依次通过被分析物质,分别测得不同波长下的吸光度或透光率,然后绘制吸收强度参数—波长曲线,即为物质的吸收光谱曲线。常以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图。最大吸收波长，max最大吸收波长：吸收曲线中显示的各个峰为吸收峰，其最大吸收峰对

6、应的波长，叫最大吸收波长。用max表示。不同物质的max是不相同的，KMnO4的吸收曲线三　朗伯－比尔定律A－吸光度I0：入射光强度I：透过光强度c：溶液的浓度b：液层宽度1.朗伯－比尔定律当一束单色光穿过透明介质时，光强度的降低同入射光的强度，吸收介质的厚度，及光路中吸光微粒的数目成正比。T－透光率（透射比）I0：入射光强度It：透射光强度tκ与入射光波长、溶液的性质及温度有关。当这些条件一定时，κ代表单位浓度的有色溶液放在单位宽度的比色皿中的吸光度。c的单位为g·L-1，b的单位为cm时，κ以a表示，称为吸光系数，其单位为

7、L·g-1·cm-1，A=abc。c的单位为mol·L-1，b的单位为cm，κ用ε表示。称为摩尔吸光系数，其单位为L·mol-1·cm-1，A=εbc。t2.摩尔吸光系数ε的讨论（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数（2）不随浓度c和液层厚度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；（3）同一吸光物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力。ε<10000,显色反应低灵敏；10000＜ε＜50

8、000时，属于中等灵敏；60000＜ε＜100000时，属于高灵敏；100000＜ε，超高灵敏。3。应用朗伯－－比尔定律的条件：（1）入射光波长应为max，且单色性好；（2）被没溶液肯有均匀性，非散射性（不混浊，非胶体）；（3）被没