抗原抗体反应的应用word版本.ppt

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1、第三节抗原抗体反应的应用一、免疫沉淀与免疫凝集二、免疫标记三、免疫定位分析四、抗原抗体反映的其他应用Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.一、免疫沉淀与免疫凝集溶液中的环状沉淀试验在体外可溶性抗原与相应抗体形成肉眼看见的沉淀物。在液相中形成的沉淀不容易观察判断，利用抗原和抗体溶液之间的界面形成的沉淀线便于观察。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientPr

2、ofile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.对照1:101:201:401:801:160抗血清稀释度抗原沉淀线抗血清环状沉淀实验示意图Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2.凝胶扩散沉淀抗原抗体在半透明的半固相介质中进行沉淀实验。抗原分子与抗体分子在凝胶介质中自由扩散，相遇形成沉淀。以琼脂扩散实验较为常用。单向免疫扩散：抗体混于琼脂中，小孔中加入抗原，抗原向周围均匀扩散，与抗

3、体形成沉淀环。可用于定量测定免疫球蛋白和补体的含量等。双向免疫扩散：抗原和抗体向周围扩散后可在两孔之间形成白色沉淀线，可用于抗原或抗体的定性检测。缺点：时间长，灵敏度低。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.单向免疫扩散：常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。抗体混于琼脂凝胶中制板沉淀环环的直径与抗原含量成正相关Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5Cl

4、ientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.双向免疫扩散——沉淀线形状的变化显示抗原间是否存在共同的抗原决定簇。AbAg1，3AbAbEvaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.3.电泳条件下的沉淀反应血清免疫电泳：患者血清和正常人血清分别放在凝胶上近负极端的小孔中进行电泳分离后，在两种抗原之间沿电泳方向挖一平行的小槽，加入抗血清进行双扩散。火箭电泳：单向免疫扩散与电泳结合

5、的一种方法。在电场作用下抗原向正极扩散，与抗体形成沉淀峰（火箭型沉淀线）。需时短，能检测微量抗原。对流电泳(电渗析)：在电场作用下抗原与抗体相对扩散，形成沉淀线。对流电泳较双扩快速和灵敏。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd

6、.Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.4.免疫共沉淀在溶液中两种或两种以上蛋白质相互作用，可以通过免疫共沉淀惊醒鉴定和分离。蛋白质相互作用通过非共价结合，用针对其中一种蛋白质的特异性抗体进行的免疫沉淀，与该蛋白相互作用的其

7、他蛋白也同时被沉淀下来。如果第一抗体结合后再加入第二抗体或A蛋白可使抗原抗体形成更大的复合物易于沉淀，也可通过加入聚乙二醇破坏水化膜加速沉淀形成。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.免疫共沉淀原理图解Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3