抗原抗体反应.ppt

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1、抗原抗体反应purposemaster:1.抗原抗体反应原理及特点。2.带现象、前带、后带、亲合力、亲和力概念。befamiliar:影响抗原抗体反应的因素。know:免疫学检测的类型。(antigen-antibodyreaction)概念:抗原抗体反应是指抗原抗体的特异性结合反应体内杀菌、溶菌、调理、中和毒素免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等体外:凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等曾称:serologicalreaction本章内容:§1抗原抗体反应的原理§2抗原抗体反应的特点§3影响抗原抗体反应的因素§4免疫学检测的类型Section1抗原抗体

2、反应的原理基本原理:特异性(AD----HVR)可见性(凝集、沉淀、溶血等)结合力(4种)高度互补(AD-HVR)紧密接触产生结合力抗原 抗体带电离子异性相吸静电引力分子极化范德华引力形成氢键氢键引力形成疏水基团疏水作用力作用最小最具特异性作用最大抗原抗体结合可见反应比例合适图抗原抗体结合力1.静电引力(electrostaticforces)或库仑引力(Cou-lombicforces)指带电离子基团(如:—NH3+和—COO-)之间的引力,距离越近引力越大。2.范德华引力(VanderWaalsforces)分子间(或原子间)相互接近,分子极化产生引力,

3、其作用取决于分子空间构型,如:凹槽与凸起互补,抗原与抗体,酶与底物。能量小于静电引力。(3)氢键结合力(hydrogenboundingforce)指供氢体氢原子与受氢体原子之间的引力—“氢键桥梁”,能量大于范德华引力。4.疏水作用力(hydrophobicforce)指疏水基团间排斥水分子,相互聚集的力。作用力最强,占总结合力的50%。抗原抗体结合力大小都与两分子间的距离密切相关只有两分子表面密切接触时,才能产生足够的力使其结合抗原与抗体之间高度的空间互补结构恰好为这些结合力的发挥提供了条件结合力的大小亲和力(affinity)表示亲合力(avidity)

4、一个抗体结合点与一个抗原表位间的结合强度。“(singlepoint---singlepoint)”亲和力用平衡常数表示:K=K1/K2亲和力(affinity):即:结合常数/解离常数K值越大,亲和力越高,与抗原的结合越牢固亲合力(avidity)指整个抗体分子与抗原表位之间结合的强度“allpoints-------allpoints”与抗体的结合价直接相关。亲合力高,与抗原结合牢固不易解离。Section2抗原抗体反应的特点一、特异性(specificity)概念:一种抗原只能与其相应的抗体结合起反应(eg.)分子基础:Ag-ADHVR-Ab空间结构高

5、度互补VH和VL各具三个HVR与AD互补意义免检中常用已知Ag未知Ab,反之亦然。查相对性:当抗原之间有相同或相似结构的AD时(共同抗原)交叉反应(crossreaction)干扰结果实验诊断如何解决?如何利用?两种不同的抗原分子具有相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应抗原抗体交叉反应示意图交叉反应(crossreactions)二、比例性(proportionality)指抗原抗体的量比关系,即只有当抗原抗体的浓度比例适当时,才出现可见反应。以沉淀反应为例(Ab量固定,Ag量递增)图Question:等价带前带后带抗原抗体反应比例性示意图

6、Why?抗原多价,抗体双价二者比例合适Ag/Ab过剩网格学说网格学说(图)抗体的两个Fab段分别结合两个Ag分子,相互交叉结合连接成巨大的网格状立体聚合物,(可见)。二者比例合适:Ab/Ag过剩过剩方的结合价得不到饱和,大多数游离存在,只形成小分子复合物(不可见)。网格学说(图)切记!!!!确定的浓度非常重要,即在实验中需对Ag/Ab进行适当的,调整二者的比例,产生可见反应。一般原则:固定含量(Ag/Ab)的浓度,稀释含量的(Ab/Ag)。一般可溶性Ag稀释,颗粒性Ag,稀释。Ag/Ab稀释低高AgAb三、可逆性(reversibility)或表面性解离1.

7、Ag+AbAg—Ab一定条件(动态平衡)动态平衡公式:[Ag]+[Ab][Ag-Ab]K1:结合常数;K2:解离常数K1K2四、阶段性特异性结合两个阶段可见反应阶段数秒~数分钟,肉眼不可见数分~数小时肉眼可见Section3影响抗原抗体反应的因素一、Ag/Ab自身因素(一)Ag理化性状:颗粒性Ag、可溶性Ag、R型细菌Ag等出现不同的Ag-Abreaction.AD的种类与数目:单价Ag来源(二)AbR型Ab:等价带宽,易出现可见反应。H型Ab:等价带窄,易出现前带或后带现象McAb:不宜用于凝集和沉淀反应。浓度:相对Ag而言,比例要和适,故实验前需滴定,以

8、求最适Ag与Ab比例。特异性与亲合力:关键因素,选择

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