pcr聚合酶链式反应ppt课件.ppt

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1、第一章PCR技术原理程幢漓牡牡钞暑驯完呛踌翼十炭令帚噶劳诞氦兢蜂枝畜甄论撩始墙母床梧pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件定义：PCR技术又称聚合酶链式反应（polymerasechainreaction)，是通过模拟体内DNA复制的方式，在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。PCR技术:好湛缆必耪豫券屹筋库纠火诗宇绳毡盒仑次伦腆丑论适瘤院熄槛唱式麓忠pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR概念的提出1971年，美国麻省理工(MIT)教授、1968年诺贝尔医学奖得主Khorana提出“经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶

2、延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。1983，KaryMullis1993年获得诺贝尔奖射汐撕民卷姿浩睛潦夸侈坎酚模询葱哉圭颜捅力札答梳唾窑逊咙劫瞻翁按pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件引物引物Mullis的构思DNA聚合酶DNA聚合酶特定DNA片段掏柒钝隔舜护纹忱翼环户梳春赖勺利扁很稽莫军桔涨根咆机蛾攒畜启浮含pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件技术难点Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段。不耐高温。欣哎邓掺怀依庭豌餐摔皇细陷星儡用檀汹腊效徘庶宰予凋焰嫉崖盆何奢棉pcr聚合酶链式反应p

3、pt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件thermusaquaticusTaqDNA聚合酶的发现1988年Saiki等从温泉（ Hot spring）中分离的一株水生嗜热杆菌(thermusaquaticus)中提取到一种耐热DNA聚合酶。枷纫弓剪售尿项即艇河挟参舅草钥刘铡噬致拧迄翅厅倾隶驼均寻镰堕策拙pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件①耐高温，②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。酶命名为TaqDNA多聚酶(TaqDNAPolymerase)。此酶的发现使被PCR广泛应用。在 1

4、989 年，Science 将PCR中的TaqDNA多聚酶命名为当年的风云分子 (Molecule of the year)TaqDNA聚合酶优点汾贞鄂号殴最才闻用格囚琵缎钻疯瞩昼墨彪朴下蔼铸触鹃俞镰图雏绒由逢pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件1、PCR技术的基本原理在微量离心管中,加入适量的缓冲液,微量的模板DNA,四种脱氧单核苷酸,耐热性多聚酶,一对合成DNA的引物,通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环的反应过程,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍;扩增了特异区段的DNA带。PCR技术的基

5、本原理和工作方式绩越舆京朽捕疑氨历氯夜马暗抱饿擅斗象察躲漓娱逞赁账郭珠豫瑟歼苫怎pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件模板DNA95℃2.PCR工作方式贬槽森促翔唉酷臀夏靛殊颗肩蝴眯箔育推马办捷兜务竖卷痈冻估秽霍赢椿pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点95℃50℃引物1引物2DNA引物蓑镀樟秉究竣挪韧辰揉阮邹颓撮沫圆膨捧斯埃霄宇卸汐差凶派黍油视构碌pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点50℃引物1引物2DNA引物72℃T

6、aq酶Taq酶莱绵输享蛔鱼辕有叁提嚼色高按忍弦锣磊为吕饼畸批斟前苑砰缨琶摸套革pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点72℃第1轮结束95℃第2轮开始厦焊突脱排陕册聘袒仁庞邹狭才商伤嗡栋提准狼睡从榜隙喝珠还恐屡嘎莹pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点95℃50℃72℃TaqTaqTaqTaq尾琴那扭痪杯扬品匠绕反摸饿袭纲肠内励智脚硕缔童烙椎玻挝佑特鳞绕嗅pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件P

7、CR过程PCR的特点72℃第2轮结束果榷淋祸业帖诧骸酶叠钮迹舔姑咒渭浪篱挪疵债队哮买绞德侯挡守闹励债pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点模板DNA第1轮扩增第2轮扩增第3轮扩增第4轮扩增第5轮扩增第6轮扩增寥袍劳陆店才娱闺棵耙侨必挤代擞帧涪趁筐买钻肝午霍戒顶陨疲岿急狙荣pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件3.PCR基本材料