生物化学实验习题及解答.doc

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1、生物化学实验习题及解答一、名词解释1、pI；2、层析；3、透析；4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳；5、蛋白质变性；6、复性；7、Tm值；8、同工酶；9、Km值；10、DNA变性；11、退火；12、增色效应1、A；2、C；3、B；4、A；5、A；6、B；7、B；8、C；9、D；10、A；11、A；12、D；13、A；二、基础理论单项选择题1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（A）A、双缩脲反应B、凯氏定氮C、紫外吸收D、羧肽酶法2、下列哪组反应是错误的？（C）A、葡萄糖——Molish反应B、胆固醇——Libermann-Burcha

2、rd反应C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应D、氨基酸——茚三酮反应3、Sanger试剂是（B）A、苯异硫氰酸B、2，4-二硝基氟苯C、丹磺酰氯D、b-巯基乙醇4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（A）A、215nmB、260nmC、280nmD、340nm5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（A）A、色氨酸的吲哚基B、酪氨酸的酚环C、苯丙氨酸的苯环D、半胱氨酸的硫原子6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（B）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同7、

3、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（B）A、茚三酮试剂B、奈氏试剂C、双缩脲试剂D、Folin-酚试剂8、蛋白质变性是由于（C）A、一级结构改变B、亚基解聚C、空间构象破坏D、辅基脱落9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（D）A、胶体性B、粘性C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（A）A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易

4、沉淀11、双链DNA热变性后（A）6A、黏度下降B、沉降系数下降C、浮力密度下降D、紫外吸收下降12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（D）A、天冬氨酸B、脯氨酸C、赖氨酸D、丝氨酸13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？（A）A、His的咪唑基B、Arg的胍基C、Cys的巯基D、Trp的吲哚基三、填空1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（）色的物质。2、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（）、（）、（）三

5、种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。3、移液枪在每次实验后应将刻度调至（），让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命，并严禁吸取（）。4、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（）代替。5、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（）和（）等。7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（）。8、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（），同样条件下，单键DNA的OD260（

6、）。9、硝酸纤维素膜可结合（）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（）印迹法。10、常用二苯胺法测定（）含量，用苔黑酚法测定（）含量。11、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。12、温度对酶活力影响有以下两方面：一方面（），另一方面（）。13、维生素C是（）酶的辅酶，另外还具有（）作用。14、在分光光度计的使用或检定中，（）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。四、问答1、紫外分光光度

7、法测定核酸含量的原理。2、蛋白质变性与沉淀的关系。63、牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。4、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。5、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质，如何排除干扰？6、体液血糖测定有哪些方法？7、DNA在电场中的迁移率取决于哪些因素？8、琼脂糖凝胶有哪些注意事项？9、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么？10、何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？11、蛋白质分离和纯化的一般方法？12、如何正确选择核酸电泳指示剂？参考答案一、名词解释1、指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值，用符号pI表示。2、按照在移动相和固定

8、相（可以是气体或液体）之间的分配比例将混合成分分开的技术。3、通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理