《微生物的实验室培养》课件-(新人教版选修1).ppt

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1、专题2微生物的培养与应用微生物病毒细菌放线菌真菌原生动物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。一、微生物特点：小简低病毒的结构病毒病毒SARS冠状病毒、禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）吸附注入合成释放组装病毒的增殖病毒的增殖一般可分五个阶段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放病毒的营养方式：寄生细菌的外形与大小细菌A.球菌B.杆菌C.弧菌常见的细菌三种典型形态ABC细菌的结构芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。芽孢：细菌形成的椭圆形的

2、休眠体菌　落单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征因种而异放线菌⑴结构：单细胞原核生物分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）（2）繁殖孢子丝

3、孢子链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的⑶应用:真菌酵母菌酵母菌和霉菌青霉生殖腐生生活孢子生殖微生物的实验室培养条件：（1）合适的营养和环境条件（2）确保其他微生物无法混入二.培养基1.概念：按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。液体

4、培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分2.类型及应用：常用于工业生产用于微生物的分离、鉴定、计数加琼脂常用于工业生产常用于分类、鉴定培养、分离出特定微生物鉴别不同种类的微生物在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成。加入高浓度食盐的培养基:不加氮源的无氮培养基:不加含碳有机物的无碳培养基:加入青霉素等抗生素的培养基:选择培养基分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌分离固氮菌分离自养型微生物伊红和美蓝,和大肠杆菌的代

5、谢产物结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽,可以用来鉴别大肠杆菌鉴别培养基大肠杆菌碳源氮源无机盐水3.营养要素还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基)牛肉膏牛肉膏当中含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素等物质。该产品广泛应用于生物制药发酵及各种培养基的制备。牛肉膏是采用新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。蛋白胨不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在着各种蛋白胨，一般来说，用于蛋白

6、胨生产的蛋白包括动物蛋白（肉类）和植物蛋白（豆类）等两种。蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。它可以作为微生物培养基的主要原料。三.无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。2.消毒与灭菌的概念及两者的区别吸管、培养皿等160~170℃、1～2h接种环、接种针等70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒灭菌定义方法较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢、孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒灼烧灭菌干热

7、灭菌高压蒸汽灭菌酒精、氯气、石炭酸等紫外线培养基，100KPa、121℃、15～30min四.实验操作---大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算－称量－溶化－灭菌－倒平板（冷却至50℃）倒平板操作（二）纯化大肠杆菌最常用的方法：平板划线法和稀释涂布平板法接种环接种针平板划线的操作方法平板划线法一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长

8、，会形成一个条状的菌落。稀释涂布平板法涂布器菌落数在30～300间计数效果较好。实验结果菌种的保存1、临时保藏法：对象：温度：缺点：2、甘油管藏法：对象：温度：结果分析与评价课题延伸（P20）频繁使用的菌种4℃（冰箱）容易被污染或产生变异长期保存的菌种-20℃（冷冻箱）【典例解析】1.关于微生物营养物质的叙述中，正确的是()A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量DB2.下面对灭菌的理解不正确的是(　　)A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必