红细胞计数和血红蛋白测定课件.ppt

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1、红细胞计数和血红蛋白测定红细胞检查2红细胞概述372小时48小时4血红蛋白(血色素，Hb或HGB)是一种微红色的胶体物质，分子量为64458。是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34毫升．成人红细胞总量约有600g血红蛋白，可携氧800毫升。血红蛋白概述1.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb62.血红蛋白分子结构及成分组成Hb的多肽链两大类：①α类链：αζ和θ链；②非α链：βδγε链。α链由141个氨基酸组成，β链由146个氨基酸组成。7每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。8在人体不同生长时期，Hb种类与比例不同：检测方法1.手工显微

2、镜法：2.血液分析仪法：任务一红细胞计数10手工显微镜法定义：测定每升血液中所含红细胞数目，用？.？X1012/L表示。11改良牛鲍计数板计数板121314【操作】1.准备计数板2.加稀释液：2ml3.加血：10μl混匀4.充池5.计数6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L151．手工法误差来源：标本、操作、器材、固有误差2．仪器法严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控质量控制161.手工显微镜法①血液分析仪的校正②白细胞减少时的对照核实。③血小板计数受小红细胞干扰时的校正2．血液分析仪法方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。方法学评价17成年：男性（4～5.5）

3、×1012/L女性（3.5～5.0）×1012/L新生儿：（6.0～7.0）×1012/L参考值181．生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期临床意义192．病理性变化(2)红细胞增多1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白量减少1）红细胞生成障碍2）造血原料缺乏3）利用障碍红细胞4）破坏过多和失血临床意义20医学决定水平①高于6.8×l012/L，应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找原因。③低于1.5×l012／L应考虑输血指该项目结果如高于

4、或低于某一个值时就应该采取一定的措施，为患者处理起提供依据的作用。临床意义21定义：血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/l表示任务二血红蛋白测定221．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法2．其他测定法十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）等检测原理23HiCN转化液：即文齐氏液540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度

5、2425血红蛋白浓度计算公式：Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251=A×367.726方法学评价27方法优点缺点HiCN操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠，试剂容易保存，便于质控，为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析AHD575同HiCN法，不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3准确度和精密度高，试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强

6、，但不破坏白细胞，适合自动化分析精密度和准确性低28质量控制29①成年：男性：120～160g／L；女性：llO～150g／L。②新生儿：170～200g／L。③老年(70岁以上)：男性：94～122g／L；女性87～112g／L。参考值30①轻度贫血，成年男性Hb＜120g/L，成年女性＜100g/L；②中度贫血＜90g/L；③重度贫血＜60g/L；④极度贫血＜30g/L。临床意义31