铁皮石斛组培技术.doc

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1、.铁皮石斛的组织培养研究专业班级:姓名:学号:课程:植物组织培养..目录摘要3Abstract4前言51.培养基51.1配方51.2配制(以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例)61.3灭菌72.转接82.1转接前准备82.2转接82.3培养93.炼苗93.1炼苗目的93.2炼苗方法94.移栽104.1基质选择104.2移栽技术要求105.结论与分析11参考文献13..摘要铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw.)多年生草本植物。铁皮石斛为石斛之极品,它因表皮呈铁绿色而得名

2、。铁皮石斛是传统名贵中药材,有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效,主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂,且种子粒径小,自然繁殖率低。为了保护和有效利用铁皮石斛,通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。关键词:铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖..AbstractDendrobiumorchidDendrobiumisaperennialherb.ItistheultimateinDendrobiumSw,namedforitsferricgreenepidermis.AsararetraditionalC

3、hineseherbalmedicine,itcontributestodrydampnessandstrengthenthespleen,clearawaylung-heat,nourishyin,clearawayheat,andsoon.ThemainmedicinalcomponentsofDendrobiumpolysaccharideisakindofimmunemodulators.Whenmature,itscapsulecracks,inwhichseedsareinsmallparticlesizeandhavealowrateo

4、fnaturalreproduction.InordertoprotectandutilizetheDendrobiumorchidDendrobium,itisparticularlyimportanttoestablisharapidpropagationbythetissueculturetechnique.keywords:DendrobiumorchidDendrobiumtissuecultureculturemediumadapterrapidpropagation..前言多年生草本,具有气生根。茎直立丛生、高30-50cm,肉质稍扁,

5、有节、有槽沟,黄绿色。单叶互生,叶片革质,无柄,狭长椭圆形或近披针形,叶鞘抱茎。总状花序腋生,每个花序有花2-3朵,白色,先端淡紫红色。铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物。作为我国传统的名贵中药,具有重要的药用价值。由于长期过度采挖,加之本身繁殖率低,导致其野生资源急剧减少,日趋濒危,现已被列为国家重点保护植物,成为国家重点保护的药材品种。试验结果表明,MS、N6和B5等3种基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的效果,B5要优于其他基本培养基;在激素浓度配中,铁皮石斛原球茎在6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L中,增殖系数最大;天然附加物对铁皮石

6、斛增殖的影响差异很大,实际应用中宜选用香蕉汁为添加剂;在B5+蔗糖30g/L+香蕉汁100mg/L+琼脂5.8g/L基本培养基中,加入的NAA对铁皮石斛芽的生根以1.0mg/L处理的效果最好,但考虑到NAA价格较贵,且在浓度范围为0.2-1.0之间对生根的影响差异不明显,在实际应用中以选用0.2mg/L的NAA为好;生成的小苗经过炼苗后,在铺有一层苔藓的含有75%锯末+20%泥炭土+5%碎磁片的基质上能够良好的生长。..1.培养基1.1配方根据不同阶段,培养基配方有所差异。如表1-1表1-1各种培养基配方不同阶段培养基备注愈伤组织(原球茎)的诱导MS

7、+2.0mg/L6-BA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.8原球茎的增殖MS+20%马铃薯+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.8原球茎的分化MS+20%马铃薯+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.8幼株的生根壮苗MS+10%香蕉+2.0mg/LNAA+3%蔗糖+0.8%琼脂pH=5.4-5.61.2配制(以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例)配方:10%香蕉(w/w)+MS+3%蔗糖(w/w)+0.8%琼脂(w/w)+2.0mg/LNAA1)量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中,加热至沸腾;2)准确称量100g香蕉果肉,切成碎片状,

8、并倒入上述烧杯中,加热煮沸5min,其间搅拌使之充分溶解;3)按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序

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