细菌浓度的简单确定法.doc

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1、细菌浓度的简单确定法：麦氏比浊法麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的，有表可查，这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同，且都有定值。麦氏比浊管的配比如下：管号(McFarland)0.5123450.25%BaCl2（ml）0.20.40.81.21.62.01%H2SO4(ml)9.89.69.28.88.48.0细菌的近似浓度(×108/ml)13691215操作方法：1、轻摇标准试管。2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径（大小）的无菌试

2、管中。3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水（NaCl），直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。使用技巧：1、直接用眼睛看（需要经验，误差较大）。2、找张白纸，打上平行直线，然后看（如图示，利用光在不同浓度液体折射不同）。注意事项：1、如果测定的肉汤培养物不澄清，由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。编者注：1、测定好的细菌，最好做一下梯度稀释涂布计数。2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度，如果是其他

3、细菌，会有一定的差别，但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内，适合于普通实验。3、此种方法测定的准确性不是很高，如果是对细菌数量要求较精确的，请用紫外分光光度计。