色谱分析yangppt课件.ppt

《色谱分析yangppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、色谱分析法第一节色谱分析法导论1906年俄国植物学家迈克尔·茨维特(MichaelTswett)从植物提取液中分离出叶绿素及其它色素利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术流动相：携带样品流过整个系统的流体固定相：静止不动的一相一、概念发现定义二、色谱法分类色谱法液相色谱法气相色谱法气-液色谱法气-固色谱法液-固色谱法液-液色谱法（一）按两相状态分类：（二）按固定相的形式分类：柱色谱：固定相装在色谱柱中；纸色谱：利用滤纸作载体，吸附在纸上的水作固定相；薄层色谱：将固体吸附剂铺在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相。（三

2、）按分离原理分类吸附色谱（adsorptionchromatography)分配色谱(partitionchromatography)离子交换色谱(ion-exchangechromatography)凝胶色谱(gelchromatography)亲和色谱(affinitychromatography)其它色谱方法超临界色谱逆流色谱高效毛细管电泳上世纪九十年代快速发展特别适合生物试样分析分离色谱分配色谱离子交换色谱离子色谱凝胶色谱液相色谱薄层色谱超临界色谱高效毛细管电泳气相色谱纸层析薄板层析毛细管气相色谱填充柱气相色谱

3、三、色谱分析的特点(1)分离效率高复杂混合物、有机同系物、异构体、手性异构体。(2)灵敏度高可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。(3)选择性高可将性质相似的组分分开(4)分析速度快一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析，一次可同时测定多个指标。对未知物分析的定性专属性差需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS)不足之处：(5)应用范围广气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。离子色谱：无机离子及有机酸碱的

4、分离分析填充柱类型气固(液固)色谱气液(液液)色谱固定相多孔性的固体吸附剂颗粒由担体和固定液所组成分离机理固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同固定液对试样中各组分的溶解能力的不同分离过程吸附与脱附的不断重复溶解与挥发的不断重复四、色谱分离过程色谱分离过程是在色谱柱内完成。以填充柱为例五、色谱流出曲线（色谱图）及有关术语（一）气相色谱法分离的过程：以分离A、B两组分为例：（二）色谱流出曲线--信号随时间的变化曲线1.基线无试样通过时的信号（1）时间表示的保留值保留时间（tR）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时

5、间死时间（tM）：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间调整保留时间（tR＇）：tR＇=tR－tM2.保留值tM（2）用体积表示的保留值保留体积（VR）：VR=tR×F0（F0为色谱柱出口处的载气流量，单位：mL/min。）死体积（VM）：VM=tM×F0调整保留体积（VR＇）：VR＇=VR－VM3、相对保留值r21组分2与组分1调整保留值之比：r21=t’R2/t’R1=V’R2/V’R1相对保留值只与柱温和固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关，它表示了固定相对这两种组分的选择性。4、区域宽度衡量色谱峰宽度的参数

6、三种表示方法：（1）标准偏差()即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。（2）半峰宽(Y1/2或W1/2)色谱峰高一半处的宽度Y1/2=2.354（3）峰底宽(Wb)Wb=4色谱流出曲线的意义：色谱峰数=样品中单组份的最少个数；色谱保留值——定性依据；色谱峰高或面积——定量依据；色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标；色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。第二节色谱分析的理论基础一、分配系数与分配比组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。一定温度下，组分在两相间达到

7、分配平衡时的浓度比称为分配系数，用K表示，即：分配系数是色谱分离的依据。1、分配系数K分配系数K的讨论一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢；试样一定时，K主要取决于固定相性质；同一组份在不同固定相上的分配系数K不同；试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础；某组分的K=0时，即不被固定相保留，最先流出；选择适宜的固定相可改善分离效果；气相色谱中柱温对K影响很大，是影响分离效果的一个关键因素2.分配比k分配比是指在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的质量比：分配比也称容量因子或容量比，分配比越大，组分保留时间越

8、长。3.分配比与分配系数的关系式中β为相比，即固定相体积Vs与流动相体积Vm之比值讨论分配系数与分配比都与组分及固定相的热力学性质有关，随柱温、柱压的改变而变化。分配系数只决定于两相性质，与两相体积无关，分配比既与两相性质有关，也与两相体积有关。3.分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数，数值越大，该组分的保留时间越长