常用pH缓冲溶液地配制和pH值.doc

常用pH缓冲溶液地配制和pH值.doc

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1、(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量  试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2.药品称量要精确。3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去

2、离子水。4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1 000ml容量瓶,再稀释至刻度(1 000ml)。2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1 000ml容量瓶,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。附表

3、1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 5.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.4 5.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.0 6.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.2 6.1 15.3 84.7 7.3 80.8 19.2 6.2 18.6 81.4 7.5 84.1 15.9 6.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.0 6.4 26.7 73.3 7.7 89.4 10.6 6.5 

4、31.8 68.2 7.8 91.5 8.5 6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8 6.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.3 6.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.2 6.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.0 7.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0 (三)0.15Mol/L PB液附表2  0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4(ml) 0.15Mol/L NaH2PO4(ml) 6.4 26.5 73.5 6.6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 

5、39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 Na2HPO4·2H2O分子量=175.05   0.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO4·12H2O分子量=358.22  0.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4·H2O分子量=138.00    0.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO4·2H2O分子量=156.03   0.15Mol/L溶液含23.4g/L。(四)0.2Mol/L PB缓冲液附表3  0.2mol/L PB缓冲液配制法pH 0.2 Mol/L Na2HPO4(ml) 0

6、.2Mol/L NaH2PO4(ml) 5.8 8.0 92.0 6.0 12.3 87.7 6.2 18.5 81.5 6.4 26.5 73.5 6.6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 7.8 91.5 8.5 8.0 94.7 5.3    0.2Mol/L Na2HPO4·2 H2O溶液35.61g/L            Na2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/L    0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L 

7、          NaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时,则在溶液中加0.85%的NaCl溶液即可。(五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)(0.15Mol/L PH 7.2)  NaCl                          8.0g  KCl                           0.2g  Na2HPO4                   

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