第6章微生物的生长繁殖及其控制-jdhppt课件.ppt

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1、第6章微生物的生长繁殖及其控制生物个体物质有规律地、不可逆增加,导致个体体积扩大的生物学过程。生长:生物个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。繁殖:生长:是一个逐步发生的量变过程,繁殖:是一个产生新的生命个体的质变过程。高等生物:这两个过程可以明显分开,低等特别是单细胞的生物:由于细胞小,这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。一个微生物细胞合适的外界条件,吸收营养物质,进行代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用个体的生长原生质的总量(重量、体积、大小)就不断增加如果各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到一定程度后

2、就会发生繁殖,引起个体数目的增加。群体内各个个体的进一步生长群体的生长群体生长=个体生长+个体繁殖个体生长→个体繁殖→群体生长在一定时间和条件下细胞数量的增加(微生物群体生长)微生物生长:在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长,这一点与研究大生物时有所不同。第一节微生物生长的测定单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化微生物生长:(参见P151)微生物生长的测定:个体计数群体重量测定群体生理指标测定评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响;评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果;客观地反映微生物生长的规律;第一节微生物生长的

3、测定(一)以数量变化对微生物生长情况进行测定通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌)1、培养平板计数法(参见P151-154)稀释(xīshì)采用培养平板计数法要求操作熟练、准确,否则难以得到正确的结果:样品充分混匀;每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液;同一稀释度三个以上重复,取平均值;每个平板上的菌落数目合适,便于准确计数;一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成单位(colonyformingunits,CFU)来表示,而不是直接表示为细胞数(P152)。(一)以数量变化

4、对微生物生长情况进行测定2、膜过滤培养法(P153)当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形成的菌落进行统计。(一)以数量变化对微生物生长情况进行测定3、显微镜直接计数法(参见P152)1)常规方法:采用细菌计数板或血球计数板,在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)。缺点:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度;个体小的细菌在显微镜下难以观察;(一)以数量变化对微生物生长情况进行测定3、显微镜直接计数法(参见P153)2)其它方

5、法:将已知颗粒浓度的样品(例如血液)与待测细胞细胞浓度的样品混匀后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。比例计数:过滤计数:当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数;活菌计数:采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数第一节微生物生长的测定(二)以生物量为指标测定微生物的生长1、比浊法(参见P153)在一定波长(400-700nm)下,测定菌悬液的光密度,以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。实

6、验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确。第一节微生物生长的测定(二)以生物量为指标测定微生物的生长2、重量法(参见P153)以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量;通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量;测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法第一节微生物生长的测定(二)以生物量为指标测定微生物的生长3、生理指标法(参见P154)微生物的生理指标,如呼吸强度,耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。(参见P354,表12-12)常用于对微生物的快速鉴定与检测样品中微生物数量多或生长旺盛,这些指标愈明显,因此可以借

7、助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。第二节细菌的群体生长繁殖微生物的特点:个体微小肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个单个的微生物组成的群体。微生物接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。(参见P134)对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础第二节细菌的群体生长繁殖一、生长曲线(参见P135)生长曲线(GrowthCurve):细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量,以培养时间为横座标,以菌数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。在微生物学中提到的“生长”,均指群体生长。一

8、、生长曲线第二节细菌的群体生长繁殖(参

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