微生物的生长繁殖及其控制ppt课件.ppt

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1、Chapter7微生物的生长繁殖及其控制生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加。生长指生物个体数目的增加。繁殖在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而且两者始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以划清，因此实际上常用群体生长作为衡量微生物生长的指标。群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程7.1.1微生物纯培养的获得1.平板划线分离法2.稀释倒平板法3.单孢子或单细胞分离法4.利用选择性培养基分离法7.1纯培养微生物群体生长1.平板划线分离法用接种环无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划

2、线或其他形式的连续划线，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。2.稀释倒平板法3.单孢子或单细胞分离法采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基进行培养。4.选择性培养基分离法各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制适合某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。微

3、生物纯培养分离方法的比较分离方法应用范围平皿划线法方法简便，多用于分离细菌稀释倒平皿法既可定性，又可定量，用途广泛单细胞挑取法局限于高度专业化的科学研究利用选择培养基法适用于分离某些生理类型较特殊的7.1.2微生物生长的测定评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；客观地反映微生物生长的规律；评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；微生物生长微生物生长测量方法个体计数法重量法生理指标法7.1.2.1个体计数法1.直接法利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需

4、要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；2.间接法原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。7.1.2.2细胞生物量的测定测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；方法：菌体分离→烘干→称重1.重量法DNA可与DABA一HCl(3.5二氨基苯甲酸一盐酸)溶液反应显示特殊的荧光。根据这种荧光反应强度求得DNA含量。2.DNA含量测定法3.ATP含量测定法微生物细胞中都含有相对恒定量的ATP,而ATP与生物量之间有一定的比例关系。用适当的试剂从培养物中提取出ATP,以分光光度

5、计测定它的荧光素一荧光素酶反应强度,经换算即可求得生物量。4.代谢活性法如微生物对糖类发酵产生酸的多少，均与原生质的含量有关系，可以推测细菌数的多少。该法是通过测定生活细胞的代谢活性强度来估算其生物量。微生物代谢作用所消耗或产生的物质量可以代表微生物的生长量。5.蛋白质量测定法蛋白质是细胞的主要组分，而蛋白质的含量是比较稳定的。可以从蛋白质量的测定求出细胞物质量，或以测定芳香氨基酸量求蛋白质量。可以测定全氮量来求蛋白质量：蛋白质量=氮量×6.25方法：菌体分离→洗涤→凯氏微量定氮法测定总氮含量7.2.3生理指标测定法样品中微生物数量多或生长旺盛，

6、这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。常用于对微生物的快速鉴定与检测微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。7.1.3微生物的生长规律7.1.3.1细菌群体生长规律在不补充营养物质或移去培养物，保持整个培养液体积不变条件下，以时间为横坐标，以菌数为纵坐标，根据不同培养时间时细菌数量的变化，可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。生长曲线生长曲线可分：延滞期对数期衰亡期稳定期221.延滞期将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，

7、或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期。迟缓期的特点：分裂迟缓、代谢活跃①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短；②利用对数生长期的细胞作为“种子”；③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大；④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的影响。在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：应用：延缓期菌体的生理特征是对外界因素敏感，因此，杀灭有害微生物宜在此时进行；与此同时，菌体遗传保守性很差，在不良因素下菌体易发生变异，故可利用此期的菌体进行诱变育种。172.对数期对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致，代谢

8、旺盛、生长迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。以最大的速