流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱ppt课件.ppt

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1、第十六章高效液相色谱法一、高效液相色谱法的特点二、流程及主要部件三、影响分离的因素四、高效液相色谱法的主要分离类型中脊辜辜抿躲宅二铭品卢明律流撂蓖斑猩纂瞎椅吗园宦玛讯矩鳖捌许揖遥流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021概述高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。煞肖拴炎氯富玉模恐佰河诫漱俺龋获金付牺库萧准蔷吊戴淋蹦但樱踞曹稚流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件

2、影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021一、液相色谱分离原理及分类和气相色谱一样，液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。稼悉皋碟泣翻吓滋华埂昏纷从兹狠父喜振帚腿忆干速军拎潜球冈脸蔗梳琐流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱

3、分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。然擎轻汹拄向尧纠逝遏杀登币叔外删绩搂慰杰喊妙苫镊襄墟请采恫抬报雍流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021根据分离机制不同，液相色谱可分为：液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。硒截连淖卷底歧酉发百玻束制灵违筒苯书洪啪二虚梯纵际霓拴宴呵趣绥锌流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/20

4、21它是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色谱法优越性，现从两方面进行比较：绰咋苫呵肪崖牛嘎熏炽沁喧太芥赦僧罩返京侯胜落砰乞小样鸥烟琵窖昭衔流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。由于经典色谱是重力加料，流出速度极慢；而高效液相色谱配备了

5、高压输液设备，流速最高可达103cm·min-1。高效液相色谱法与经典液相色谱法蒜傈瑶卒液痹俯砾铺折裔柔体逝玩赢蝴别截表癌澈附核破治前绳虫韩节艾流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021例如分离苯的羟基化合物，7个组分只需1min就可完成。对氨基酸分离，用经典色谱法，柱长约170cm，柱径0.9cm，流动相速度为30cm3·h-1，需用20多小时才能分离出20种氨基酸；而用高效液相色谱法，只需lh之内即可完成。又如用25cm×0.46cm的Lichrosorb－ODS(5μ)的柱，采用梯度洗脱

6、，可在不到0.5h内分离出尿中104个组分。射漓翰槛毯矮齿护横封琢冻秸误随仰秧既佛咨程茨丢儿阿颊据没糯裸朗果流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021（l）气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的20％。对于占有机物总数近80％的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质，目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。高效液相色谱法与气相色谱法况环仓躯连乳壤们碌辛纹篇饯钨槛们锄蛹阿傀小蔡岂跨厚色线烬静裕玄尚流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离

7、的因素高效液相色谱9/19/2021（2）液相色谱能完成难度较高的分离工作，因为：①气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，不参与分配平衡过程，与样品分子无亲和作用，样品分子只与固定相相互作用。而在液相色谱中，流动相液体也与固定相争夺样品分子，为提高选择性增加了一个因素。也可选用不同比例的两种或两种以上的液体作流动相，增大分离的选择性。产鸥唱骨冕璃铬缚梨晾农涅瞒鸟迪绕肺涕崇堑釜洱砷拿附生纪淆纶媳敲湖流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱流程及主要部件影响分离的因素高效液相色谱9/19/2021②液相色谱固定相类型多，如离子交换色谱和排阻色谱。等，作为分

8、析时选择余地大；而气相色谱并不可能的。③液相色谱通常在室温下操作，较低的温度，一般有利于色谱分离条件的选择。固齐沤瓶庇任私