糖基化对蛋白功能影响-有图.doc

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1、糖基化对膜蛋白功能影响常常是很重要的，对特异的生物学功能起介导作用:1，对细胞具有保护、稳定、组织及屏障等多方面作用；2，可作为外源性受体的特异性配体，某些糖连可作为各种病毒、细菌及寄生物的特异受体；3，糖连也可作为内源性受体的特异性配体，参与介导清除、周转及胞内穿行作用；4，最后要说的正是我所关心的：在受精和发育生物学中，糖连在受精过程中起着重要的作用，这方面的证据有：在小鼠卵透明带糖蛋白ZP3上的O－聚糖参与精卵结合。活细胞中去糖基化的方法：1，衣霉素在体内阻断N－连糖，2，将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了

2、多唾液酸的特异性作用－－将高纯度酶注入细胞内＋恰当的对照3，将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达4，在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉蛋白质的修饰与加工包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等，其中最主要的是糖基化，几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用是：①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用；②赋予蛋白质传导信号的功能；③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。糖基一般连接在4种氨基酸上，分为2种：O-连接的糖基化（O-linkedglycosylation）：与Ser、Thr和Hyp的OH

3、连接，连接的糖为半乳糖或N-乙酰半乳糖胺，在高尔基体上进行O-连接的糖基化；N-连接的糖基化（N-linkedglycosylation）：与天冬酰胺残基的NH2连接，糖为N-乙酰葡糖胺，如图（图为N-连接的糖基化引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002）。对已知蛋白序列的：1。蛋白酶切，2-D胶，糖链染色，可确定糖基化位点2。用糖苷酶将糖切下，NMR可分析糖单体结构3。分离切下的糖链，质谱分析4。........