分子生物学重点.docx

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1、染色体与DNADNA的一级结构:脱氧核糖核苷酸以3’-5’磷酸二酯键聚合成为脱氧核糖核酸(DNA)链。链的一端的核苷酸有自由的5’磷酸基团,称5’端;另一端核苷酸具有自由的3’羟基,称3’端。DNA一级结构的重要性:携带遗传信息;决定DNA的二级结构;决定DNA的空间结构DNA的二级结构:绕DNA双螺旋表面上出现的螺旋槽(沟),宽的沟称为大沟,窄沟称为小沟。大沟,小沟都是由于碱基对堆积和糖-磷酸骨架扭转造成的。主链是由两条反向平行的核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手螺旋结构,脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架。两条链上

2、的碱基以氢键相连,G与C配对,A与T配对。嘌呤和嘧啶碱基对层叠于双螺旋的内侧。蛋白质因子与DNA的特异结合依赖于氨基酸与DNA间的氢键的形成。蛋白质因子沿大沟与DNA形成专一性结合的机率与多样性高于沿小沟的结合。DNA的变性和复性:DNA的变性:DNA双链的氢键断裂,逐步变为近似于无规则线团的过程称为变性;DNA的变性发生在一个狭窄的温度范围内。增色效应:在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。DNA超螺旋和拓扑异构酶:DNA的高级结构(P36)1)定义:指DNA双螺旋进一步扭曲盘

3、绕所形成的特定空间结构。是一种比双螺旋更高层次的空间构象。2)主要形式:超螺旋结构(正超螺旋和负超螺旋)影响DNA高级结构的酶:拓扑异构酶----L值的改变需要至少一条DNA链断裂一次。断裂造成的DNA自由末段的一端可绕着另一端旋转,随后被重新连接,DNA拓扑异构酶通过催化此类反应将DNA从一种拓扑结构转变成另一种。C-值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。C-值矛盾(C-valueparadox):形态学的复杂程度(物种的生物复杂性)与C-值大小的不一致,称为C值矛盾(C-值悖理)。真核细胞基因组的最大特点是它含有大量的重复

4、序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开原核生物染色体及其基因组:原核生物的基因组很小,大多只有一条染色体,且DNA含量少,如大肠杆菌DNA的相对分子质量仅为4.6×106bp,其完全伸展总长约为1.3mm,含4000多个基因。原核生物基因主要是单拷贝基因,只有很少数基因〔如rRNA基因〕以多拷贝形式存在;整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成;几乎每个基因序列都与它所编码的蛋白质序列呈线性对应状态。原核细胞DNA特点:1、结构简炼。原核DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质的,只有很小一部分控制

5、基因表达的序列不转录。如在ΦX174中不转录部分只占4%左右(217/5386),T4DNA中占5.1%(282/5577)。2、存在转录单元。原核生物DNA序列中功能相关的RNA和蛋白质基因,往往丛集在基因组的一个或几个特定部位,形成转录单元并转录产生含多个mRNA的分子,称为多顺反子mRNA。3、有重叠基因。一些细菌和动物病毒存在重叠基因,同一段DNA能携带两种不同蛋白质的信息。真核生物染色体及其基因:真核生物染色体的组成:DNA和蛋白质。蛋白质包括组蛋白和非组蛋白。组蛋白包括H1H2AH2BH3H4。端粒、着丝点和DNA复

6、制原点是构成染色体不可缺少的三个要素。组蛋白的一般特性:进化上的保守性;无组织特异性;肽链氨基酸分布的不对称性;组蛋白的可修饰性;H5组蛋白的特殊性:富含赖氨酸(24%)非组蛋白:非组蛋白占组蛋白总量的60-70%,主要包括酶类、与细胞分裂有关的收缩蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白以及肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等。非组蛋白的多样性:非组蛋白种类约在20-100种之间,其中常见的有15-20种。非组蛋白的组织专一性和种属专一性。(1)高速泳动蛋白(HMG):富含赖AA、精AA、谷AA与天冬AA,与DNA的超螺旋结构有关。

7、(2)DNA结合蛋白:与DNA的复制或转录有关的酶或调节物质。(3)A24非组蛋白:与H2A差不多大小,呈酸性,含谷AA与天冬AA多,位于核小体内,功能不详。核小体:用于包装染色质的结构单位,是由DNA链缠绕一个八聚体组蛋白核心构成的。染色体的包装:念珠状染色质细丝形成;染色质细丝盘绕成螺线管;进一步压缩成超螺旋染色体。真核生物基因组结构特点:真核基因组结构庞大,一般远大于原核基因组;含有大量重复序列;非编码序列多,多于编码序列(9:1);转录产物为单顺反子;基因不连续性:断裂基因、内含子、外显子;顺式作用元件:启动子,增强子,

8、沉默子等;DNA多态性:单核苷酸多态性,串联重复序列多态性;端粒。原核生物基因组结构特点:基因组很小,大多只有一条染色体;结构简炼;存在转录单元(transcriptionaloperon);多顺反子(polycistron);有重叠基因(Sanger发现)DN

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