制备色谱离子色谱和超临界流体色谱ppt课件.ppt

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1、第八章Chapter8现代色谱分析Modernchromatography目录1.高效制备液相色谱HPPC2.离子色谱IC3.超临界流体色谱SFC一、高效制备液相色谱HPPChighperformancepreparativeliquidchromatography制备型液相色谱：获得高纯（色谱纯）物质的有效方法。基本原理：利用各组分物理化学性质差异，使其不同程度分布在不相溶的两相中，且各组分在两相多次分布，从而达到分离的目的。HPPC特点:（1）多为细颗粒多孔填料，分离效率高；（2）应用广泛，如极性和非极性、离子型和非离子型、小分子和大分子、热稳定性和热不稳定性化合物

2、；（3）据化合物理化性质配检测器,如UV、DAD、FD、ELSD;（4）可连续自动化操作。分析柱：内径1～6mm，柱长5～30cm半制备柱：内径8mm，长15～30cm，一次制备0.1～1mg制备柱：内径20～50mm，柱长50cm，粒径25～100µm，流速可达数十mL/min比较：高效液相色谱法：分离分析，追求高准确度、分析精度。液相制备色谱法：分离纯化，追求低成本。比较：分析液相制备液相样品从检测器进入废液瓶样品从检测器进入收集器化合物定性或/和定量化合物分离或/和纯化HPPC发展20世纪50-60年代第一个制备柱色谱仪；70年代第一套制备液相系统，小粒径、高压泵

3、HPPC应用化工、制药、天然产物、生物技术和生化中珍贵产品的分离和纯化。量应用范围pg酶的分离mg生物、生化试验结构鉴定：合成副产物、生物基质中代谢物、天然产物g标准品毒理试验化合物kg工业规模、活性化合物、药物按固定相分类：半制备型（小规模制备型）：≤100mg制备型：0.1～100g大规模制备型：≥100gHPPC分类按进样量分类：正相、反相、凝胶、离子交换、亲和色谱等1.色谱柱的柱容量（柱负荷）超载：进样量超过柱容量。柱效迅速下降，峰变宽。对分析柱：不影响柱效时的最大进样量对制备柱：不影响收集物纯度时的最大进样量超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子k降低1

4、0%为宜2.液相制备色谱的方法收集组分的几种情况：（a）可获得良好分离，主峰（b）用制备柱，超载提高效率；（c）两主成分之间的小组分；超载，分离切分使待分离组分成为主成分（富集）后，再次分离制备。3.制备型液相色谱仪制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大、进样量大、采用制备柱；柱后馏分收集器。制备柱：内径20～50mm，柱长50cm。二、离子色谱IonChromatography,IC离子色谱法：用电导检测器对阳、阴离子混合物作常量和痕量分析的色谱法。1.离子色谱法原理principleofIC利用色谱技术测定离子型化合物，即以无机(特别是无机阴离子)混合物为主要

5、分析对象。传统离子交换色谱存在着两个难于解决的问题：(1)需要高浓度淋洗液洗脱且洗脱时间很长；(2)洗脱后的组分缺乏灵敏、快速的在线检测方法。1975年，H.Small及其合作者创建离子色谱，八十年代迅速发展离子色谱法原理离子交换原理，与传统离子交换的不同点：采用交换容量非常低的特制离子交换树脂为固定相；细颗粒柱填料，高柱效；采用高压输液泵；低浓度淋洗液或本底电导抑制（在分离柱后，采用抑制柱来消除淋洗液的高本底电导）；可采用电导检测器，快速分离分析微量无机离子混合物；各种抑制装置及无抑制方法的出现，发展迅速。2.离子色谱的优点（1）分析速度快数分钟内完成试样的分析；（2

6、）分离能力高适宜条件下，可使常见各种阴离子混合物分离(多组分分离分析)。例：使用双柱法，十几分钟内，七种阴离子完全分离。（3）分离混合阴离子的最有效方法（4）耐腐蚀，仪器流路采用全塑件，玻璃柱3.离子色谱装置类型suppressedapparatusofIC抑制型：抑制柱型、连续抑制型、双柱型分离柱中离子交换树脂的交换容量通常在0.01～0.05mmol/g干树脂。加一根抑制柱，消除检测干扰。非抑制型:单柱型进一步降低分离柱中树脂的交换容量(0.007～0.07mmol/g干树脂)，使用低浓度、低电离度的有机弱酸及弱酸盐作淋洗液，如苯甲酸、苯甲酸盐等。检测器可直接与分离

7、柱相连，不需抑制柱。离子色谱连续抑制装置图通过抑制柱将洗脱液转变成了电导值很小的水，消除了本底电导的影响洗脱剂NaOH中的Na+与高容量的拟制柱中交换树脂产生离子交换，OHˉ和H+中和产生水，从而消除洗脱剂本底对检测的干扰。离子色谱连续抑制原理图4.离子色谱的应用applicationofIC低浓度无机或有机阴离子分析、碱金属、碱土金属、重金属、稀土金属盒有机酸、胺和铵盐等（1）水质分析、高纯水离子分析、矿泉水、雨水、废水及电厂水分析；（2）纸浆和漂白液分析、食品分析、生物体液分析（3）钢铁工业、环境保护等应用。分析对象：双柱；薄壳型阴离