动物细胞与组织培养细胞工程ppt课件.ppt

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1、第一章动物细胞与组织培养1第一节动物组织细胞培养基础一、动物细胞特点进化程度更高，结构、成分更复杂，功能更全面。细胞大，无细胞壁动物细胞的连接更丰富：封闭连接：紧密连接、间壁连接锚定连接：粘合带与粘合斑，桥粒与半桥粒通讯连接：间隙连接，化学突触2动植物细胞区别？？紧密连接存在于脊椎动物的上皮细胞间（图11-1），长度约50-400nm，相邻细胞之间的质膜紧密结合，没有缝隙间壁连接是存在于无脊椎动物上皮细胞的紧密连接，连接蛋白呈梯子状排列，形状非常规则，连接的细胞内骨架成分为肌动蛋白纤维。粘合带呈带状环绕细胞，一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连

2、接下方。在粘合带处相邻细胞的间隙约15～20nm。桥粒存在于承受强拉力的组织中，如皮肤、口腔、食管等处的复层鳞状上皮细胞之间和心肌中存在于可兴奋细胞间的一种连接方式，其作用是通过释放神经递质来传导兴奋。由突触前膜(presynaptic membrane)、突触后膜(postsynaptic membrane)和突触间隙(synaptic cleft)三部分组成 突触前神经元的突起末梢膨大呈球形，称突触小体二.动物细胞生长特性生长缓慢，倍增时间长，易受污染需氧量少，对机械搅拌或剪切力敏感细胞间主要以聚集体形式存在原代细胞一般繁殖50代即退

3、化死亡代谢产物具有生物活性,生产成.本高,但附加值也高9一些不同形状的人体细胞10血液凝块11Ｔ细胞与Ｂ细胞巨噬细胞白血球巨噬细胞纤灭癌细胞Ｔ细胞与Ｂ细胞免疫细胞12巨核细胞：直径40～70μm，有时可达100μm13骨细胞14癌症细胞15第二节动物细胞与组织培养基本概念一分类:动物细胞与组织培养：(CellandTissueCulture)指的是从动物组织或细胞从体内取出，在模拟体内生理环境，无菌、适当温度和一定营养条件下，使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。细胞培养(CellCulture)培养物是单个细胞和细胞群。器官培养（Or

4、ganCulture）培养的是器官的原基、器官的一部分或整个器官，使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。16细胞培养的分类PrimaryCulture:Cellstakendirectlyfromatissuetoadish原代培养：直接取自动植体的组织或细胞的培养。SecondaryCulture:Cellstakenfromaprimarycultureandpassedordividedinvitro.传代培养：从原代培养的细胞的继续转接培养称为传代培养。17接触抑制（Contactinhibition）将多细胞生物的细胞进行体

5、外培养时，分散贴壁生长的细胞一旦相互汇合接触，即停止移动并抑制生长的现象。密度抑制（DensityInhibition）虽发生接触抑制，只要营养充分，细胞仍然能够进行增殖分裂，但当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制。18细胞系(cellline)：原代细胞经第一次传代后，形成的细胞群体，即具有增殖能力，类型均匀的培养细胞。细胞株(cellstrain)：细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的细胞群体。19二发展历史动物细胞组织培养的奠基人是美国生物学家哈里森，1907

6、年,哈里森将蛙胚的神经组织培养在淋巴液中，存活了几周时间，并观察到细胞突起的生长过程。1923年，法国学者卡勒尔（Carrel）设计了卡氏瓶培养法，用于培养鸡胚的心肌组织取得成功，扩大了组织生存空间。1951年，厄尔（Earle）发明了体外培养动物细胞的人工合成培养基。20三动物细胞培养的应用生物制品的生产转基因动物的培养检测有毒物质医学研究21四培养细胞按生长方式分:（一）贴附型细胞：（1）成纤维细胞型细胞：（2）上皮型细胞:（3）游走型细胞（4）多形型细胞（二）非贴附型细胞(悬浮型)但有些细胞既可贴附生长，也可悬浮生长。22（一）贴附

7、型细胞细胞贴附在支持物表面生长，只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞细胞之间相互接触细胞与胞外基质接触232425（1）成纤维细胞型细胞：长梭形或不规则，细胞在支持物表面呈梭形或不规则形生长，细胞中央有卵圆形核，胞质向外伸出2-3个长短不同的突起，生长时呈放射状、漩涡状走向。26成纤维细胞27（2）上皮型细胞:此类型细胞在培养器皿支持物上生长具有扁平状，细胞呈三角形或不规则多角形，中央有圆形核，细胞彼此紧密相连成单层膜。生长时彼此紧密连接成单层细胞。生长时呈膜状移动，处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤

8、表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。Hela细胞呈现为典型的上皮细胞型。28上皮型细胞29主动脉血管内皮细胞（100倍）30（3）多形型细胞形态上不规则的细胞，一般分胞