真菌课件萌芽培训讲课稿.ppt

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1、真菌课件萌芽培训真菌是院内感染常见微生物占院内感染的--7.5%血液感染的--第四位肿瘤病人发病率--为8%严重创伤、烧伤病人--高达16%死亡率高--达55%~70%真菌感染的流行病学概况真菌感染的第一个变化:深部真菌感染上升,其中曲霉菌感染明显上升;近20年真菌感染的第二个变化:白色假丝酵母菌比例减少,其他念珠菌的比例上升。曲霉菌引起全身感染的病例已不罕见,死亡率增加。真菌感染的危险因素基础疾病广谱抗生素使用静脉插管及各种侵袭性操作肾上腺糖皮质激素、免疫抑制剂、放射性或化学治疗后、器官移植后高龄(>65岁)、婴幼儿住院时间长,尤其

2、是入住ICU大于5天以上真菌概述浅部真菌深部真菌双相型真菌真菌感染的分类根据真菌侵犯人体的部位分为四类:浅表真菌病皮肤真菌病皮下组织真菌病系统性真菌病浅部真菌病深部真菌病临床常见的真菌病浅表真菌病花斑癣掌黑癣毛结节菌病皮肤真菌病皮肤癣菌病—手足、体股、头、甲皮肤念珠菌病皮下真菌病孢子丝菌病着色芽生菌病暗色丝孢霉病足菌肿系统性真菌病念珠菌病曲霉病隐球菌病接合菌病双相真菌感染浅部真菌病限于皮肤最外层,甲板、毛发和粘膜的感染。主要的感染是皮肤癣菌病和浅表念珠菌病。大多轻微,容易诊断,对治疗反应良好。手、足、甲癣—最常见的真菌病各种头癣:传染

3、、危害健康皮下真菌病—往往经过外伤发病孢子丝菌病着色芽生菌病系统性真菌病常起源于肺,可以播散到全身许多器官,严重的可引起死亡。常通过吸入致病菌孢子而获得,其致病菌腐生于土壤或腐败有机物中,或作为植物致病菌。病原体可分为两组:真正的致病菌和条件致病菌。系统性真菌病—危及生命系统性真菌病主要的致病真菌荚膜组织胞浆菌粗球孢子菌皮炎芽生菌巴西副球孢子菌临床常见的条件性真菌感染念珠菌病:最常见,血源感染的第4位。曲霉菌病:常见于干细胞移植、实体器官移植、大剂量化疗患者。隐球菌病:艾滋病人患病率为10-20%。接合菌病(毛霉病):

4、多见于重症糖尿病、烧伤病及器官移植病人。临床有增多趋势的条件致病性真菌非白念念珠菌感染毛孢子菌感染地霉感染镰刀菌感染枝顶孢霉感染暗色真菌感染马尔尼菲青霉真菌感染的诊断方法真菌镜检真菌培养组织病理生理生化血清学方法分子生物学真菌镜检革兰染色各种真菌均染成革兰阳性直接镜检氢氧化钾(KOH)标本墨汁标本隐球菌其它染色(糖原染色、镀银染色、乳酸酚棉蓝染色等),组织病理学真菌直接镜检的操作1.采集标本于载玻片上,滴加10%KOH一滴2.覆上盖玻片并微加热,略加压制片后作镜检3.查见真菌的有形成分(菌丝、孢子)即为阳性,反之,则为阴性真菌

5、直接涂片的诊断价值最重要又基本的检测方法,一般医院都能开展,能为临床提供及时的诊断依据。发现真菌的有形成分如菌丝、假菌丝或较多的孢子往往提示真菌感染。根据菌丝、孢子的形态,部分可确定病原菌隐球菌:墨汁涂片中可见厚而透亮的荚膜念珠菌:假菌丝及芽孢马拉色菌:粗短如香蕉状的菌丝和圆形的孢子毛霉菌:粗大而不分隔的菌丝念珠菌病-直接镜检隐球菌病—直接镜检新型隐球菌组织病理学阿申蓝染色H&EPAS组织学特点Immunochemistry皮肤隐球菌病的组织病理学菌丝孢子曲霉病的组织病理学Prof.RicharddCalderone’slecture-20

6、06,Beijing曲霉病曲霉头双分支菌丝曲霉病——直接镜检双分支菌丝曲霉头接合菌(毛霉)病—直接镜检粗大无分隔菌丝真菌的培养培养特性:营养要求不高,在沙保(Sabouraud)培养基上,PH4~6生长良好,需氧。浅部真菌:22~28℃,生长缓慢,大多于1~2周出现典型菌落。深部感染真菌:37℃长的最好,生长较快,3~4天即长出菌落。真菌各种培养法常用真菌培养基及用途培养基用途沙保培养基真菌的常规培养放线菌酮-氯霉素琼脂同上玉米粉聚山梨酯-80琼脂观察白假丝酵母菌的厚膜孢子马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)观察真菌菌落色素,用于鉴别真菌尿素琼脂用生

7、化反应鉴别真菌(红色癣菌和石膏样癣菌)心脑浸液葡萄糖血琼脂深部真菌培养(二相性真菌)真菌的鉴定方法:生化反应:用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。芽管形成厚膜孢子生成免疫学及分子生物学试验镜检:丝状真菌常见病原真菌酵母及酵母样真菌_念珠菌_隐球菌_毛孢子菌_马拉色菌等霉菌(丝状真菌)_皮肤癣菌_曲霉菌_毛霉菌_镰刀菌等双相真菌念珠菌-实验室检查直接镜检:可见卵园形发芽孢子及菌丝,如查到大量假菌丝,说明念珠菌处于致病状态。染色:革兰染色,菌丝、芽孢呈蓝色,着色不均匀。过碘酸染色,菌丝、芽孢染成红色。用1:1000吖啶橙染色,在荧光

8、显微镜下,菌体呈现荧光。培养:最常用的培养基是沙保氏培基,当菌落生长后再移种至米粉吐温80培基或其它鉴定培养基中,以便进一步鉴定菌种。芽管试验(Germ-tubetest)原理

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