生物样品分析测定备课讲稿.ppt

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1、生物样品分析测定第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物在生物体内的存在状态药物代谢——保证临床用药的安全、合理和有效药物代谢的部位：肝脏、肾、脾、肺、肠粘膜、胎盘等药物代谢反应第一阶段（一相）：P450等催化下的氧化、还原、水解等反应，增大极性第二阶段（二相）：与葡萄糖醛酸、硫酸盐等结合，进一步增大极性，随尿排出第三节生物样品的制备常用生物样品生物样品的选取原则能够反映出浓度与药效之间的关系易于获得便于处理根据不同目的和要求进行选取第三节生物样品的制备常用生物样品常用生物样品的种类、特点与采集血浆(plasma)血样——血清(serum)全血(wholeblood)尿液(urine

2、)——用于药物剂量回收、药物肾清除率及生物利用度的研究※尿液药物浓度变化大，应测定一定时间内尿中药物总量。※尿液与血液中药物的相关性差。※尿中药物大多呈缀合状态。第三节生物样品的制备常用生物样品常用生物样品的种类、特点与采集唾液(saliva)——用于药物浓度监测和药代动力学研究其他——动物脏器组织匀浆等样本的代表性——力求取样条件标准化样品的贮存血样—离心，冷冻保存尿液－立即测定，否则应冷藏或加防腐剂第三节生物样品的制备样品预处理提取方法的选择依据药物的理化性质-酸碱度、极性、挥发性、可能的生物转化途径等药物的浓度范围药物测定的目的生物样品的类型样品处理与分析技术的关系第三节生物样品的

3、制备样品预处理药物的提取蛋白质处理利用蛋白质脱水沉淀有机溶剂、中性盐等利用蛋白质形成不溶性盐沉淀酸性沉淀剂（TCA、高氯酸、苦味酸等）重金属盐（Zn2+、Cu2+）其他方法加热、离心、超滤和透析、酶消化法第三节生物样品的制备样品预处理药物的提取缀合物（结合物）水解酸水解—无机酸※简便快速，但专属性差，有可能造成被测物分解。酶水解葡萄糖醛酸苷酶(glucuronidase)芳基硫酸酯酶(arylsulfatase)※专属性强，一般不会造成被测物分解，但水解时间长，费用高。溶剂解第三节生物样品的制备样品预处理药物的提取冷冻干燥适用于-大批量的生物样品-水溶性很强的样品-挥发性样品-对热不稳定

4、的样品第三节生物样品的制备样品预处理药物的分离与净化液-液萃取萃取率：不低于50%影响提取率的因素pH值提取溶剂离子强度离子对提取第三节生物样品的制备样品预处理药物的分离与净化液-固萃取固相提取柱（使用硅藻土、氧化铝、离子交换树脂、活性炭等填充剂）“干混合物”萃取待测组分的富集真空挥发或通气流挥发衍生化处理第三节生物样品的制备样品预处理待测物的损失吸附、化学降解、衍生化反应、络合、蒸发样品玷污增塑剂脂肪酸和酯类其他第四节生物样品内药物分析方法分析方法建立的一般步骤以纯品进行测定确定线性范围、最适测定浓度、灵敏度、最佳测定条件等空白样品测定以水代替空白样品，添加对照品后测定了解提取回收率和

5、最低检测浓度的大致情况空白样品中添加对照品后测定（回收率实验）实际样品测定第四节生物样品内药物分析方法方法的评价准确度（accuracy）回收率—相对稳定与参比方法相比较—相关系数r>0.95精密度（precision）各浓度点RSD不应大于15%，最低定量限不应大于20%。灵敏度检测限(LOD)、定量限(LOQ)、最低检测浓度第四节生物样品内药物分析方法方法的评价方法的专属性（specificity）注重考虑代谢物、内源性物质和同时服用药物的干扰线性范围--相关系数r>0.99样品稳定性考察长期贮存(-20℃/-70℃)、短期室温贮存冷冻-解冻循环稳定性贮备液稳定性第四节生物样品内药物

6、分析方法常用测定方法光谱法紫外可见分光光度法荧光分光光度法色谱法电泳法免疫分析法此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢