海藻糖 透性 静息细胞 酶学特性 工艺 海藻糖合酶

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1、海藻糖论文:制备透性静息细胞生产海藻糖技术研究【中文摘要】海藻糖是一种安全的非还原性二糖,具有保湿性,抗冻抗干燥性,热酸稳定性等特性,对生物大分子有着非特异性的保护作用。海藻糖在医学、食品工业、化妆品行业、农业等领域有着广泛的应用前景,但是其高成本,制取上的困难限制了它的广泛应用。本论文立足于恶臭假单胞菌透性静息细胞技术生产海藻糖,把海藻糖合酶固定在细胞内,而新合成的海藻糖又可以自由的排到细胞外,为海藻糖的生产提供了一条新途径。论文内容包括透性静息细胞的制备,优化透性静息细胞的产酶条件,渗透压对静息细胞透性和

2、酶活的影响,透性化海藻糖合酶反应工艺及其特性的研究。海藻糖合酶是胞内酶,通过细胞破碎制取纯酶较为困难,酶活损失大,所以可采用2%甲苯渗透处理静息细胞2h,制得透性静息细胞,将透性静息细胞代替纯酶进行酶促反应。通过实验对比甲苯处理与超声破碎处理的效果,发现处理后酶活力基本一致,说明甲苯可以完全渗透细胞。本论文对产酶培养基的成分进行优化,讨论了不同培养基成分对酶活和菌体量的影响,得到最佳产酶培养基:葡萄糖2%,牛肉膏1%,K2HP040.1%,NaH2PO40.1%,MgSO4.7H2O0.05%(w/v)。应用

3、正交试验设计法,得到最佳发酵工艺...【英文摘要】Tehaloseisasecurenon-reducingsaccharide,moisturizing,resistanttofrostanddryingconditions,stabilizedtoheatandacid,andprovidesnonspecificprotectionforbiologicmolecule.Ithasabroadprospectofapplicationforpharmaceuticals,agriculture,cosm

4、eticsandfoodindustry,etc,buthasn’tbeenwidelyusedduetohighcostandprepapationdifficulty.ThisthesismainlystudiedtrehaloseproductionthroughpermeablerestingcellsfromPseudomonasputida.Inthisstudy,trehalosesynthaseis...【关键词】海藻糖透性静息细胞酶学特性工艺海藻糖合酶【英文关键词】trehaloseperm

5、eabilityrestingcellsenzymaticpropertiesprocesstrehalosesynthase【索购全文】联系Q1:138113721Q2:139938848【目录】制备透性静息细胞生产海藻糖技术研究摘要9-10ABSTRACT10-11第1章绪论12-281.1引言12-131.2研究背景131.3海藻糖的生物学功能和特性13-161.4海藻糖保护机制的四种假说16-171.4.1“稳定态”161.4.2“优先结合”161.4.3“玻璃态”161.4.4“水替代”16-171

6、.5海藻糖的检测17-191.5.1薄层层析(TLC)171.5.2纸层析(PC)17-181.5.3高效液相色谱(HPLC)181.5.4蒽酮比色法181.5.5气相色谱(GC)18-191.5.6酶法191.6海藻糖的生产方法及研究进展19-251.6.1微生物抽提法19-201.6.2重组植物生产法201.6.3微生物发酵法20-211.6.4酶法合成海藻糖21-241.6.5制备透性静息细胞生产海藻糖研究进展24-251.7论文选题的背景、意义及思路25-281.7.1透性化静息细胞制备海藻糖的意义2

7、5-261.7.2论文的主要研究内容和任务26-28第2章恶臭假单胞菌透性静息细胞的制备28-382.1引言28-292.2实验材料29-312.2.1菌种292.2.2主要仪器292.2.3主要试剂29-302.2.4培养基30-312.3实验方法31-342.3.1菌种培养方法312.3.2静息细胞的制备312.3.3透性化细胞海藻糖合酶(粗酶液)的制备31-322.3.4酶活的测定322.3.5超声破碎细胞322.3.6菌体量的测定322.3.7海藻糖的检测方法32-342.4实验结果和讨论34-372

8、.4.1最佳渗透剂的选择34-352.4.2最佳渗透剂浓度和渗透时间的选择352.4.3最佳渗透温度的选择35-362.4.4细胞渗透效果的验证36-372.5本章小结37-38第3章透性静息细胞产酶条件和发酵工艺的优化38-543.1引言383.2实验材料38-393.2.1菌种383,2,2主要仪器383.2.3主要试剂383.2.4培养基38-393.3实验方法39-413.3.1菌种培养方法

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