第四周机能实验的上课内容

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1、实验一　坐骨神经腓肠肌标本制备【目的和原理】　两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物近似，但其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。在生理实验中常用蟾蜍或蛙的离体组织或器官作为实验标本。如用蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律及骨骼肌收缩特点等。因此，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。【实验对象】　蟾蜍或蛙【实验器材和药品】　蛙板，玻璃板，蛙手术器械1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪各1把，有齿镊子、园头镊子、眼科镊子各1把，刺蛙针1个，玻璃分

2、针2支，蛙钉4枚，滴管2支)，培养皿1个，烧杯100ml、50ml各1个，手术丝线，棉花，锌铜弓1个，任氏液。【实验步骤】1．破坏脑和脊髓　取蟾蜍1只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，用拇指按压背部，食指按压头部前端，使头前俯。右手持刺蛙针由头部前端沿正中线向尾端触划，当触划到凹陷处，即枕骨大孔所在部位。将刺蛙针由此处垂直刺入枕骨大孔，然后折向前刺入颅腔并左右搅动，充分捣毁脑组织。再将刺蛙针抽回至进针处，再折向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。如果蟾蜍下颌呼吸运动消失，四肢松软，表明脑和脊髓已完全破坏。否则，

3、须按上法再行捣毁。（见图1-1）2．剪除躯干上部及内脏　左手捏住蟾蜍脊柱，右手持粗剪刀在骶髂关节水平以上0.5～1cm处剪断脊柱，再沿脊柱两侧剪开腹壁，使躯干上部与内脏自然下垂，剪除躯干上部和所有内脏，留下后肢、骶骨、部分脊柱及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。3．剥皮及分离下肢左手捏住脊柱断端(注意不要压迫神经)，右手捏住断端皮肤边缘，向下牵拉剥掉全部后肢皮肤。用任氏液冲洗下肢标本，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱及耻骨联合中央剪开两侧下肢，并完全分离。将两下肢标本置于盛有任氏液的培养皿内备用。洗净手及用过的器械。4．

4、制备坐骨神经腓肠肌标本（1）游离坐骨神经　取一侧下肢标本腹面朝上放置于玻璃板上，用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经，并于靠近脊柱处穿线、结扎并剪断。轻轻提起扎线，用眼科剪刀剪去周围的结缔组织及神经分支。再将标本背面朝上放置，将梨状肌及周围的结缔组织剪去。在股二头肌与半膜肌之间的缝隙处，即坐骨神经沟，找出坐骨神经大腿段。用玻璃分针仔细剥离，边剥离边剪断坐骨神经所有分支，将神经一直游离到腘窝。（2）完成坐骨神经腓肠肌标本　将游离干净的坐骨神经轻轻搭在腓肠肌上，在膝关节周围剪去全部大腿肌肉，并用粗剪刀将股骨刮干净，在

5、股骨中段剪断股骨。在跟腱处穿线并结扎，在结扎处远端剪断跟腱。游离腓肠肌至膝关节处，轻提结扎线，然后将膝关节下方小腿其余部分剪除。这样一个具有附着在股骨上的腓肠肌并带有支配其收缩的坐骨神经标本就制备完成了。（见图1-2）5．检查标本兴奋性用浸有任氏液的锌铜弓轻轻触及坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本的兴奋性良好。将标本置于盛有任氏液的培养皿中待其兴奋性稳定后用于实验。【注意事项】１.穿刺脑和脊髓时，不要将蟾蜍的背部对着自己和别人的面部，以防蟾酥溅入眼内。如果蟾酥不慎溅入眼内，应立即用生理盐水冲

6、洗。2．用玻璃分针分离标本，避免用力牵拉神经或用金属器械、手夹捏神经，以免神经损伤。3．制备标本过程中，应随时给肌肉和神经滴加任氏液，保持湿润，以使标本保持正常的兴奋性。4．标本制成后，应置于任氏液中浸泡数分钟，待其兴奋性稳定后再进行实验。实验二不同刺激强度和频率对骨骼肌收缩的影响【实验目的】• 观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响，掌握阈刺激、阈上刺激和最大刺激等概念。• 观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响，了解强直收缩的机制。【实验原理】一条坐骨神经干是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成的。保持足够的刺激时间不

7、变，刚好能引起其中兴奋性较高的神经纤维产生兴奋，表现为受这些神经纤维支配的肌纤维发生收缩，此时的刺激强度即为这些神经纤维的阈强度，具有此强度的刺激叫阈刺激。随着刺激强度的不断增加，有较多的神经纤维兴奋，肌肉的收缩反应也相应逐步增大，强度超过阈值的刺激叫阈上刺激。当阈上刺激强度增大到某一值时，神经中所有纤维均产生兴奋，此时肌肉做最大收缩。再继续增强刺激强度，肌肉收缩反应不再继续增大。将引起肌肉最大收缩的最小刺激强度的刺激称为最大刺激。不同频率的电脉冲刺激神经时，肌肉会产生不同的收缩反应。若刺激频率较低，每次刺

8、激的时间间隔超过肌肉单次收缩的持续时间，则肌肉的反应表现为一连串的单收缩；若刺激频率逐渐增加，刺激间隔逐渐缩短，肌肉收缩的反应可以融合，开始表现为不完全强直收缩，以后成为完全强直收缩。【实验对象】蟾蜍。【实验器材】蛙类解剖手术器材、蜡盘、任氏液、铁支架、微调固定器、张力换能器、烧杯、RM6240生物信号采集处理系统。【方法和步骤】1、 离体坐骨神经腓肠肌标本（见实验一，但是股骨要留长一些，以便固定）2、实验装置•