微生物学实验10培训讲学.ppt

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1、微生物学实验201310基本原理：环境中的微生物在营养丰富的培养基平板中经过培养即可长成肉眼可见的菌落，从而可检测到环境中存在的微生物的类型和数量。实验材料：营养琼脂平板、灭菌棉签、恒温培养箱等实验方法和步骤：（P6-7）每四个同学为一组，每个同学一个营养琼脂平板，每人各选取以下其中一种处理方法（或你感兴趣的其他方法），写好标签：实验室空气中的微生物：比较培养基暴露于空气不同时间的区别：打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中10min，盖好皿盖；打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中30min，盖好皿盖；2.比较洗手前后手指上微生物的区别：在培养皿底部用记号

2、笔分四个区（A、B、C、D区），洗手前后分别用手指在培养基表面轻按。（注意不要按碎培养基。）盖好皿盖。3.口气中的微生物：打开皿盖，对着培养基吹气。4.实验台面的微生物：用灭菌棉签揩拭实验台面，再用此棉签在培养基表面滚动一下，也可用同样方法检测你所感兴趣的其他地方或物品。处理完成后，盖好皿盖，倒置培养皿，置于37℃温箱培养1-2天观察，记录实验结果。实验结果：将实验结果记录于下表（P8）：表1：微生物检测的结果记录表处理方法（1）（2）（3）（4）菌落数量菌落特征（大小、形状、透明度、颜色等）简要说明菌落数量可用“+”和“-”来表示，从多到少依次表示

3、为++++，+++，++，+，-分析及讨论：思考题：通过本次实验，在防止微生物污染与扩散方面，你学到了些什么？有何体会？实验二显微镜的使用和细菌基本形态的观察（P40-47）学习并掌握显微镜，特别是油镜的工作原理和使用方法；熟练使用显微镜观察细菌的个体形态。实验项目号：80000039101实验类型：验证性实验目的：1.光学部分:接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等).它使检视物放大,造成物象.2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持调节固定等作用.显微镜的构造基本原理：微

4、生物的个体很小，必须要借助显微镜才能看清其形态。1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数2.显微镜的分辨率是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：D=λ/2n·sin(α/2)式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。：可见光的波长（平均0.55m)n:物镜和被检标本间介质的折射率。：镜口角（即入射角）。显微镜的放大倍数和分辨率1.香柏油的折射率与玻璃接近，提高了视野的照明度。2.提高了显微镜的分辨率油镜使用的原理实验材料：玻片标本：球状：四联球菌（Micrococcustetragenus）杆状：枯草杆菌（Bacil

5、lussubtilis）螺旋状：水弧菌（Vibrioaquatilis）示范片：溶血链球菌（Streptococcushemolyticus）其他器材：显微镜、香柏油、清洁剂、擦镜纸等用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。调节光亮度低倍镜观察：粗调、细调高倍观察：细调油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，旋开高倍镜，在标本中央滴一滴香柏油，转过油镜，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。换片：另换新片，必须从“3”开始操作。标本片的清洁：用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量清洁剂擦去残留的油，最后用擦镜纸

6、擦去残留的清洁剂，后将镜体全部复原。实验方法和步骤：（P44-45）主要是油镜的使用1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度3.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。6.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。显微镜保养和使用

7、中的注意事项：四联球菌链球菌水弧菌枯草杆菌细菌基本形态的观察利用油镜，观察细菌的基本形态（球状、杆状和螺旋状），边观察边绘图。观察结果（绘图）P46分析及讨论：菌名拉丁学名放大倍数绘出在油镜下观察到的形态图，注意菌体的形态、大小比例、排列，同时标明菌名(包括拉丁学名)和放大倍数（物镜的放大倍数×目镜的放大倍数）用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间滴加香柏油有什么作用？镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？影响显微镜分辨率的因素有哪些？思考题：（P47）实验三细菌简单染色及革兰氏染色学习微生物制片、染色的基本技术；了

8、解革兰氏染色的原理，掌握革兰氏染色的方法；巩固油镜的使用方法，熟练观察细菌的个体形态。实验项目号：80000