微波辅助提取虎杖中白藜芦醇工艺探究

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1、微波辅助提取虎杖中白藜芦醇工艺探究  【摘要】目的:优选微波辅助提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺。方法:用紫外分光光度法测定白藜芦醇的含量,并以白藜芦醇的提取率为参考指标,通过单因素实验及正交实验方法对微波辅助提取法(MAE)提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺进行研究。结果:经过正交实验得到从虎杖白藜芦醇的最佳工艺为:微波辅助作用时间15min以70%的乙醇为提取剂,料液比1:30,微波辅助功率为500W。结论:该实验确定的最佳提取工艺简便、快速、准确,灵敏度高和重现性好等优点。【关键词】虎杖白藜芦醇微波辅助提取正交

2、实验紫外分光光度法虎杖别名花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙、斑杖根,为蓼科植物虎杖Polygonum11cuspidatum,的干燥根茎和根。多生于山谷、溪旁或岸边,分布在我国中部及南部。产于江西、福建、云南、四川、贵州等地。药理作用:(1)对心血管系统的影响:强心扩血管作用;抑制血小板聚集、抗血栓;改善微循环、抗休克作用;降血脂;(2)对呼吸系统的影响:镇咳、平喘作用;(3)对消化系统的影响:胃肠道作用、保肝用;(4)止血抗炎作用;(5)镇静作用;(6)修复损伤的DNA及保护大脑皮层神经元功能、对酶

3、活性抑制作用、对内分泌的影响、对基因表达的影响、利尿作用等[1]。研究结果表明虎杖含有如下多种化学成分:含有大黄素、大黄素-6-甲醚、大黄素-8-单甲醚、大黄酚、大黄酸及蒽苷大黄素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖苷和大黄素-8-β-D-葡萄糖苷等[2];含有白藜芦醇和白藜芦醇苷(虎杖苷).其中白藜芦醇和白藜芦醇苷为主要药用成分。白藜芦醇(3,4,5,-三羟基二苯乙烯;trans-resveratrol)是一种活性多酚物质,在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜芦、毛脉酸模等植物中存在[3]。白藜芦醇的功能作用:首先,具有

4、抗癌作用,可用于预防与治疗慢性炎症和癌症。对肿瘤的起始、促进、发展三个阶段均有抑制作用,可作为天然的化学防癌剂。其次,在心血管方面的作用。适量饮用葡萄酒有利于心血管健康的观点已得到普遍认同。另外,白藜芦醇还具有抗氧化、抗自由基,保护肝脏,抗菌,消炎,抗过敏等多种有益人体的功能作用[4]。目前,国内在白黎芦醇的提取方面研究较多。一般是采用有机溶剂提取,如乙醇、甲醇、丙酮等,以丙酮提取率最高。提取方式有浸渍提取、回流提取、超声提取等,硅胶柱层析或大孔吸附树脂吸附分离的方法来提纯白黎芦醇;检测多以高效液相色谱。本

5、实验以微波辅助提取,具有省时、方便等作用,微波辅助提取中药有效成分具有选择性好、提取纯度高和高效快速的特点,已在中草药化学成分提取方面得到广泛应用。11有关虎杖中白藜芦醇、白藜芦醇苷和大黄素含量测定方法的研究报道较多,主要有分光光度法、胶束薄层色谱法、电化学发光法、高速逆流色谱法、高效液相色谱等[5-6],其中以分光光度法最为简单方便。本研究探讨微波辅助提取虎杖中白藜芦醇的工艺研究,并建立测定白藜芦醇含量的紫外分光光度法,旨在为虎杖的药理作用研究以及科学合理利用提供试验依据。1实验部分1.1原料、试剂与仪器

6、(1)实验原料、试剂;虎杖,产地:福建三明;95%乙醇;乙酸乙酯;石油醚;均为化学纯;白藜芦醇,产地:美国,分析纯。(2)实验仪器;TR-02型药材粉碎机:(武义县屹立工具有限公司);LWMC-205型可调功率微波化学反应器:(南京陵江科技开发有限责任公司);SHB-III循环水式多用真空泵:(郑州长城科工贸有限公司);UV-2550型紫外分光光度计:(厦门精艺兴业科技有限公司);FA1604N型电子天平:(上海精密科学仪器有限公司);RE-52B旋转蒸发仪:(上海博经经贸公司);SYP智能型玻璃恒温水浴锅

7、:(巩义市予华仪器责任有限公司);玻璃仪器气流烘干器:(巩义市予华仪器责任有限公司)722S-可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司。1.2分析方法11本方法采用紫外分光光度计在306.4nm出测量所提取液的吸光度。一定的波长下有吸收峰进行测定。白藜芦醇的英文名Resveratrol简写RES,分子式C14H12O3,分子量228.25,无味、白色晶体难溶于水,易溶于乙醇,甲醇,丙酮等有机溶剂,本实验以白藜芦醇为对照品,以乙醇为溶剂,采用分光光度法在306.4nm波长下直接进行白藜芦醇吸光度值的测定,从而

8、分析计算其含量。1.3实验步骤11(1)备料;把虎杖根茎烘干、把干净的虎杖用粉碎机粉碎,过40目筛后放存储瓶中备用。(2)配制溶液;分别配制45%、55%、65%、70%、75%、80%的乙醇溶液:乙酸乙酯:水为1:1的溶液。(3)供试品溶液制备;按照实验方案准确称取1.0g若干份虎杖根茎粉末,分别置于三角锥形瓶中,加入相应浓度和体积的乙醇浸泡6小时,置于微波化学反应器中按方案提供的条件提取,冷却室温后抽滤;加石

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