农杆菌转化法原理教学内容.doc

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1、…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………农杆菌转化法原理：　　农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞)，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。　　根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减速分裂稳定的遗传给后代，这

2、一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。　　人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。　　农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应，主要包括：①受伤的植物细胞为修复创伤部位，释放一些糖类、酚类等信号分子。②在信号分子的诱导下，农杆菌向受伤组织集中，并吸附在细胞表面。③转移DNA上的毒粒基因被

3、激活并表达，同时形成转移DNA的中间体。④转移DNA进入植物细胞，并整合到植物细胞基因组中。　　方法：（根据不同受体环境基因要求而不同）　　1．农杆菌准备　　2．外植体的准备（愈伤组织、悬浮细胞系、幼嫩茎段或叶片）;　　3．用MS-AS液体培养基稀释原菌液15倍（1.5ml/20ml）或离心后稀释3倍;　　4．外植体与菌液共培养20分钟;　　5．放置在带滤纸的培养皿上（注意充分吸干多余的菌液）;　　6．将外植体接种到MS-AS固体诱导培养基，培养2－3天;　　7．移至含卡那霉素（Kan）300mg/

4、L和羧苄青霉素（Cb300mg/L）的固体筛选培养基上进行Kan抗性愈伤组织的筛选;　　8．隔20天，进行第二次筛选；　　9．抗性愈伤组织在固体筛选培养基上分化成苗；·　　10在生根培养基上生根，获得完整的再分化植株。作文不用愁～语文名师揭秘写作十大技巧 一、写外貌不用“有” 作文如何写外貌？孩子的作文里总会看到类似这样的名子：“XX可漂亮了，她有一头卷卷的黄头发，有一双乌黑的葡萄般的大眼睛，有一个高高的鼻子，还有一张樱桃小嘴。” 如果你试着让他们去掉文中的“有”，把文字重新串联一遍，会发现作文顺了

5、很多。写上段文字的同学经蒋老师指导后修改如下：“…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………2…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………XX可漂亮啦。一头卷卷的黄头发自然地披在肩上。她的眼睛太吸引人了，乌黑乌黑葡萄一般。高高的鼻子，和樱桃小嘴配合起来，有点混血的味道，同学们可喜欢她啦。”是不是读起来舒服多了？ 二、写说不出现“说” 让孩子比较以下三句话。 张三说：“……”； 张三无可奈何

6、地说：“……”； 张三摊了摊手，一副无可奈何的样子：“……” 显然，让人物说话有多种方式，写语言可以不用出现“说”而是在语言前面加上动作和神态，通过一定的训练掌握这样的技巧让孩子的写作水平切实得到提升，让他们学会细节描写，不会仅干巴巴的地写“某某说”。 三、写想不出现“想” 遇到描写心理活动时，这样的句子已经被孩子们写滥：“我脑子里跳出两个小人，一个小人……另一个小人……”不用这个句子又该怎么写？最常用的就是“我心想”。如某学生写：“…………………………………………………………最新精品资料推荐………

7、……………………………………………2