板栗壳斗总酚对高脂糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影响

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1、板栗壳斗总酚对高脂糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影响陈思玉刘玉军*（北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083）[摘要]目的：观察板栗壳斗总酚对II型糖尿病伴高血脂模型大鼠血糖与血脂水平的影响。方法：通过腹腔注射链脲佐菌素，配合高脂饲料诱导建立糖尿病脂代谢紊乱大鼠模型。将动物随机分为模型对照组、板栗壳斗总酚大剂量组（300mg/kg）、小剂量组（150mg/kg）及甲糖宁组，并设正常对照组。给药8周后处死大鼠，取血清测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。结果：与正常对照

2、组对比，模型组血糖FPG、TC、TG、LDL水平显著升高，HDL水平显著降低；与模型对照组比较，大剂量组血糖及血脂水平有显著改善，小剂量组血糖水平显著改善，血脂水平无显著变化。结论：板栗壳斗提取物能显著改善高脂糖尿病模型大鼠的血糖水平，大剂量时能显著调节血脂水平。[关键词]板栗；壳斗；血糖；血脂；糖尿病[基金项目]TheFundamentalResearchFundsfortheCentralUniversities(JD2010-2)[通讯作者]*刘玉军，E-mail:yjliubio@163.com，主要研究方向:药用植物学化学II型糖尿病患者除血糖水平异常升

3、高外，还普遍存在脂代谢紊乱的现象，主要表现为血液甘油三酯（TG)、总胆固醇（TC)和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)水平升高，腹部脂肪增加.研究调节血糖血脂的药物对于预防和治疗糖尿病，提高糖尿病人的健康状况具有重要意义。板栗壳斗是板栗（CastaneamollissimaBlume）果实外的带刺毛壳，采收后作为废弃物抛弃。2010年，沈阳药科大学与日本明治医科大学合作研究发现，板栗壳斗中含有的山奈酚、没食子酸、3,4-二甲基苯甲酸、鞣花酸、苯甲基-6-O-β-d-葡萄糖苷等多种化学成分具有醛糖还原酶抑制活性，其中鞣花酸与苯甲基-6-O-β-d-葡萄糖苷活性最为显著

4、，提示这些物质具有一定的降糖活性；2011年，MujićA.等研究发现，板栗壳斗粗提物能够修复链脲佐菌素（STZ）诱发的Rin-5F大鼠原代β胰岛细胞的损伤，同样提示板栗壳斗提取物具有一定的降糖作用，同年，尹培培等研究发现，板栗壳斗提取物能显著降低STZ诱导的糖尿病模型大鼠血糖水平，从而在整体动物水平验证了板栗壳斗的降糖活性，该活性可能与板栗壳斗总酚的抗氧化活性相关。本研究旨在进一步评价板栗壳斗总酚对高脂糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影响，从而对板栗壳斗总酚的生物活性有更充分的认识。1材料1.1动物清洁级Wistar雄性大鼠，体重100~120g，由军事医学科学院动物

5、中心提供，许可证号：SCXK-00118901.2仪器RT-9000型半自动生化仪（深圳雷杜生命科学股份有限公司），GT-1640型日本京都血糖仪以及相应试纸（爱科来国际贸易（上海）有限公司）。1.3试剂链脉佐菌素与甲糖宁（Sigma公司），大鼠甘油三酯测定试剂盒、葡糖糖试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒、总胆固醇试剂盒（自中生北控生物科技股份有限公司），高脂饲料（军事医学科学院动物中心，配方为：10%猪油，20%蔗糖，2.5%胆固醇，1.0%胆酸盐，66.5%普通动物饲料）。2方法2.1板栗壳斗总酚制备干燥的板栗壳斗1kg，加入50%乙醇

6、8L，80℃回流提取三次，每次1h，浸提液经纱布过滤、离心后将上清液合并，50℃，0.1MPa真空减压浓缩至原体积的20%，然后用蒸馏水将浓缩液补充至原体积，静置24h，取上清，进一步离心（5000rpm×10min）后收集上清液。将上清液通过蒸馏水平衡好的HPD100大孔树脂层析柱(600mm×60mmi.d.)，然后依次用4L的去离子水洗脱,4L50%乙醇洗脱，收集50%洗脱液，然后于50℃，0.1MPa真空浓缩成膏，最后冷冻干燥得到板栗壳斗总酚，并于−20°C避光保存。2.2高脂糖尿病大鼠模型的建立与分组雄性Wistar大鼠，适应性喂养一周后，选取体重在20

7、0~250g的大鼠，给予高脂饲料喂养一个月，空腹24h后腹腔注射STZ（55mg/kg），5天后尾静脉取血测定大鼠空腹血糖浓度，选取空腹血糖值大于11.1mmol/L的40只糖尿病模型大鼠。将40只糖尿病模型大鼠随机分为4组，分别为大剂量组、小剂量组、甲糖宁组和模型对照组。空腹12h后，大剂量组灌胃给予板栗壳斗总酚300mg/kg，小剂量组灌胃给予板栗壳斗总酚150mg/kg，甲糖宁组灌胃给予甲糖宁100mg/kg，模型对照组灌胃给予等量生理盐水。实验中每天给药1次，共给药8周，并于给药后的14天（2wk），28天（4wk）、42天（6wk）、56天（8wk）尾静

8、脉取血测定