论葛根素对ⅱ型糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

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　　论葛根素对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖和血脂的影响摘要：目的：观察葛根素对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素敏感性及血糖、血脂的作用。方法：采用四氧嘧啶复制糖尿病大鼠模型；高脂饲料复制高血脂大鼠模型,分别观察葛根素160mg/（kg·d）、80mg/（kg·d）、40mg/（kg·d）连续腹腔注射6周对其空腹血糖、血清中胰岛素（Insulin,Ins）水平、胰岛素敏感指数（ISI）、糖化蛋白、肝糖原合成和高脂血症大鼠血脂水平的影响。结果：各给药组与模型组相比血糖值明显降低（P＜0.05或P＜0.01）；Ins水平降低；ISI升高(P<0.05或P<0.01)；糖化蛋白明显降低（P＜0.01）；肝糖原合成增加；葛根素注射液高剂量组对高糖高脂大鼠总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）有降低作用（P＜0.01，P＜0.05），而对高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）无影响。结论：葛根素有明显的降糖和降脂作用，可改善机体的胰岛素敏感性，具有一定的临床应用价值。关键词：葛根素；血糖；Ⅱ型糖尿病大鼠 葛根素是从豆科植物野葛或甘葛藤根中所提取出的一种黄酮苷，其化学结构为8-C-β-D-葡萄糖基-7，4＇-二羟基异黄酮［１］。已有研究表明［２～4］，葛根素可通过抑制蛋白非酶糖基化反应和醛糖还原酶活性，提高胰岛素敏感性，减轻胰岛素抵抗并清除自由基而产生降血糖作用。糖尿病是一种常见的内分泌代谢紊乱性疾病，临床常以脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗为Ⅱ型糖尿病患者的主要特征，也是糖尿病患者易合并心、脑血管疾病的主要原因。本研究通过尾静脉注射2%四氧嘧啶溶液和灌胃高胆固醇乳剂或花生油（市售），建立高糖高胆固醇或高糖高甘油三酯动物模型，以观察葛根素对模型动物血糖、血清胰岛素水平及血脂的影响，为其临床上防治糖尿病及其并发症提供基础理论依据。1材料与方法1.1试验药物葛根素注射液购自浙江康恩贝制药股份有限公司，批号060703；金芪降糖片由天津市中药厂提供，批号0610235。1.2动物SD大鼠，购于河北医科大学实验动物科学部，清洁级，合格证：医动学第04057号，体重180g～200g。性别均为雄性。1.3试剂 四氧嘧啶由中国医药公司北京采购站提供，批号060410；氢化可的松由上海信义药厂提供，批号060801-3；胰岛素注射液由徐州万邦生物化学制药厂提供，批号060120；葡萄糖氧化酶试剂盒由北京化工厂提供，批号0681110；果糖胺测试盒由上海化学试剂研究所提供，批号060802。胆固醇、甘油三脂测试盒均由北京中生生物工程高技术公司提供，批号060901。1.4方法1.4.1高血糖和高血脂模型鼠的建立：大鼠禁食（不禁水）12h，用生理盐水将四氧嘧啶新鲜配制成2%四氧嘧啶溶液，按60mg/kg尾静脉注射，48h后测定禁食12h的空腹血糖，采血后离心制备血清，采用葡萄糖氧化酶法测定血糖，挑选血糖值≥10mmol/L者为高血糖鼠。高胆固醇乳剂或花生油（市售）以2mL/只给高血糖鼠灌胃，连续2周，建立高胆固醇或高甘油三酯模型鼠。成模大鼠再随机分为糖尿病模型组、高胆固醇或高甘油三酯模型组、葛根素注射液高剂量治疗组、中剂量治疗组、低剂量治疗组，每组10只大鼠。1.4.2给药方法：葛根素注射液分为高剂量、中剂量、低剂量组，每组10只动物，按160mg/（kg·d）、80mg/（kg·d）、40mg/（kg·d）连续腹腔注射6周，空白对照和模型组同时注射等体积丙二醇。1.4.3 指标检测：以葡萄糖氧化酶法测定血糖；采用蒽酮法测定肝糖原含量；采用果糖胺法按试剂盒说明测定糖化蛋白（DMF）值；采用酶法按试剂盒说明测血脂；采用抽提法测定肝甘油三酯。以放射免疫法测定血清Ins；以空腹血糖与空腹胰岛素乘积的倒数计算ISI，取其自然对数表示；FFA测定按试剂盒操作说明进行；HOD-PAP法测总胆固醇（TC），GPO-PAP法测甘油三酯（TG），直接法测高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。1.4.4统计方法：实验结果以（x±s）表示，采用配对t检验、成组t检验、方差分析或秩和检验。2结果2.1对正常大鼠血糖的影响(见表1)大鼠随机分为5组，正常对照组、金芪降糖片组（连续灌胃6周）、葛根素注射液高剂量治疗组、中剂量治疗组、低剂量治疗组连续腹腔注射6周。禁食12h，于末次给药3h后，采血离心制备血清，采用葡萄糖氧化酶法按试剂盒说明测定血糖值。结果表明葛根素注射液高剂量治疗组、中剂量治疗组、低剂量治疗组对正常大鼠血糖值无明显影响（P＞0.05）；金芪降糖片（2.1g/kg）对正常大鼠血糖有降低作用（P＜0.01）。表1对正常大鼠血糖值的影响与对照组比较：*P＞0.05，***P＜0.012.2对高血糖大鼠血糖、肝糖原合成、血清Ins、ISI及糖化蛋白的影响（见表2） 大鼠随机分为5组，正常对照组、模型组、葛根素注射液高剂量组、中剂量组、低剂量组，高血糖大鼠每组血糖值相差＜1.1mmol/L。连续给药6周，末次给药后3h采血，采用葡萄糖氧化酶法按试剂盒说明测定血糖值；放射免疫法测定血清Ins；以空腹血糖与空腹胰岛素乘积的倒数计算ISI，取其自然对数表示；采用果糖胺法按试剂盒说明测定糖化蛋白（DMF）值。结果表明模型组与正常对照组相比血糖值明显升高（P＜0.01）；血清Ins水平明显升高、ISI降低(P<0.01)；糖化蛋白明显升高（P＜0.01）。各给药组与模型组相比血糖值明显降低（P＜0.05或P＜0.01）；Ins水平降低，ISI升高(P<0.05或P<0.01)；糖化蛋白明显降低（P＜0.01）。上述动物采血后，腹腔注射葡萄糖2.0g/kg，1h后取肝组织，采用蒽酮法测定肝糖原含量。结果表明葛根素注射液高剂量组、中剂量组、低剂量组分别使肝糖原合成增加266%、231%、182%，模型组却下降34.8%。&n