温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响

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1、实验二温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响一、实验目的1、了解温度对酶活性的影响,学会检测酶最适温度的方法。2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。二、实验原理(一)温度对酶活性的影响一方面是温度升高,酶促反应速度加快。另一方面,温度升高,也将导致酶活性降低甚至丧失。因此大多数酶都有一个最适温度(即酶促反应速度最快时的环境温度)酶的最适温度不是一个常数,它与作用时间长短有关。人唾液中淀粉酶为α-为淀粉酶,在唾液腺细胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下,淀粉被水解,经过一

2、系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有 不同颜色反应,分别呈现为:蓝色紫色褐色红色 棕黄色(遇碘不显色)。(二)激活剂和抑制剂对酶反应的影响酶活力常受到有些物质的影响,有些物质能使酶活力增强,称为酶的激活剂;另一些物质则能使酶活力降低,称为酶的抑制剂。剂i]三、试剂和器材1、实验器材(1)恒温水浴锅(2)试管(3)烧杯(4)量筒(5)玻璃棒(6)白磁板(7)铁三角架(8)酒精灯(10)试管夹(11)试管架(12)秒表2、实验试剂(1)0.5%淀粉的0.3%氯化钠溶液(2)KI-I2(3)1%

3、NaCl(4)1%CuSO4(5)1%Na2SO4(6)0.1%淀粉溶液(7)唾液淀粉酶四、操作步骤(一)温度对酶活性的影响取6支试管,编号,按下表的顺序准确地加入各种试剂,记录结果。管号1230.5%淀粉的0.3%氯化钠(mL)2.02.02.0温度(℃)冰浴3770各保温10min管号1E2E3E唾液淀粉酶(mL)1.01.01.0温度(℃)冰浴3770各保温10min1和1E,2和2E…各对应管混和并摇匀后,置各温度保温5-10min*KI-I2液(滴)111记录观察结果*(二)激活剂和抑制剂对酶活性的影响试

4、剂管号12341%NaCl(mL)1.0———1%CuSO4(mL)—1.0——蒸馏水(mL)———1.01%Na2SO4(mL)——1.0—0.1%淀粉(mL)1.51.51.51.5唾液淀粉酶1.01.01.01.0摇匀,置37℃水浴中5~15分钟,取出冷却。KI-I2(滴)1-2滴1-2滴1-2滴1-2滴记录结果五、注意事项1、本实验中的保温时间是5min-10min,因不同的唾液淀粉酶的活性是不同的。2、淀粉溶液与酶液务必充分混匀,反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。思考题1、高温导致酶活性丧失的分子机理

5、是什么?如何在酶的分离纯化中克服这种影响?2、哪些因素可以导致酶活性的降低?剂i]

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