最新检验核医学(核素示踪技术)课件ppt.ppt

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1、检验核医学(核素示踪技术)核素示踪的原理与设计核素示踪的原理一、根据同位素核素化学性质相同的原理二、根据同位素核素物理性质不同的原理1放射性核素的可测性测β、γ等2稳定性核素的可测性(1)测稳定性核素的“原子百分超”(2)活化分析核素化学核素核子数目在自然界中的核素名称符号符号A=P+N百分数(%)稳定性氢H11H1=1+099.9844稳定氘D21H2=1+10.0156稳定氚T31H3=1+2极少不稳定四、核素示踪实验的特点优点1灵敏度高2精确定位3方法简单4符合生理条件缺点1辐射生物效应22H有物理毒性3稳定核

2、素测量仪器昂贵核素稀释法基本原理化学物质在稀释前后质量不变。一定比活度的放射性核素或标记物与其非标记化合物均匀混合后,混合物的放射性活度不变但比活度下降。设:稀释前标记物质量m1,比活度s1加入非标记物质量m2,稀释后标记物比活度s2则:s1m1=s2(m1+m2)若:m2>>m1上式简化为:s1m1=s2m2单位:m(mmol,mg),s(dpm/mmol,mg)基本方法1正稀释法用已知量标记物测定未知量非标记物应用一:体外标本定量已知s1,m1,混合后测定s2,求m2m2=(s1-s2)m1/s2应用二:体内组分

3、容量测定已知V1,C1,混合后测定C2,求V2V2=(C1-C2)V1/C2单位:V(ml),C(dpm/ml)2反稀释法用已知量非标记物测定未知量标记物(1)标本中有多种标记物应用一:药代动力学研究,s1已知。已知s1,m2,混合后测定s2,求m1m1=s2m2/(s1-s2)应用二:双稀释法,s1未知。取双份等量待测标记物(A相同)分别加入不同量的非标记物混合。已知m2,m3,混合后测定s2,s3,求m1s2(m1+m2)=s3(m1+m3)m1=(s3m3-s2m2)/(s2-s3)(2)标本中只有一种标记物先

4、测定待测标记物的放射性活度,再加入非标记物混合。已知A,m2,混合后测定s2,求m1,s1A=s2(m1+m2)m1=(A/s2)-m2A=s1m1,s1=A/m1建立核素稀释法的条件1正确选用标记化合物(1)标记化合物与待测物应具有完全相同的化学性质(2)标记原子应在化合物的稳定位置上(3)标记物必须无毒性(4)标记物应有足够高的化学纯度和放化纯度2保证准确的稀释度3建立可靠的样品分离和纯化方法物质转化示踪技术参入实验方法研究生物体系中化合物A与B是否前身物与产物关系A→B前身物产物方法:1A→٭A2引入体内3分离

5、出٭B4测量放射性测量,化学量测量常用离体参入实验法,包括组织切片、组织匀浆、游离细胞、亚细胞颗粒或无细胞酶系统等参入实验参数:1参入百分率=B总放射性(cpm)/A总放射性(cpm)2相对比活度(参入率)=B比活度/A比活度3百万细胞放射性计数(cpm/106cell)刺激指数=刺激组(cpm)/对照组(cpm)应用:3H-TdR参入实验:从3H-TdR参入DNA的量作为细胞转化能力(增殖速度)的指标,比较正常、病理状态以及外界干预等情况注意:1参入时间,S期参入量大2收集细胞用过滤法(玻璃纤维滤膜、微孔滤膜)放射

6、自显影术概念放射性核素所产生的射线直接作用于感光材料,使其产生潜影,经显影、定影处理而得到与放射性核素所在部位、强度一致的由银颗粒组成的影像。这种利用感光材料检查、记录和测量放射性示踪剂在生物体内位置和数量的方法,称为放射自显影术,所得到的图像,称为放射自显影像。放射自显影术和放射自显影像可简称为自显影(ARG)。特点1具有累积成像的效应,灵敏度高。2液体核乳胶及3H标记物应用,分辨率可达光镜1μm,电镜0.1μm3图像逼真直观,定位准确。宏观自显影整体分布光镜自显影组织或细胞内的分布电镜自显影细胞亚显微(超微)结构

7、的定位4在保持细胞结构完整下研究生物大分子。5可以把形态结构与放射性物质的行径动态过程(功能)有机结合。放射自显影的原理(1)AgBr(明胶)+β→Ag+Br+e-(2)e-+Ag+→Ag(3)Ag••••••Ag→nAg(4)经显影、定影处理显示出影像负片光学摄影被照物明,反射光线强,底片黑度高被照物暗,反射光线弱,底片黑度低正片放射自显影核射线强,自显影像黑度高核射线弱,自显影像黑度低实训五培养基的制备与灭菌微生物与发酵工艺玲喷划娄初病韦呻站弓蝎酸而茬炽省吟弗伶底大肯翌渺霉嘻辱目嘴锹冲峙实训五培养基的制与灭菌实训

8、五培养基的制与灭菌一、实验目的1.学会一般培养基的制备原理、方法。2.掌握培养基及器皿的灭菌方法。恭雕凶匠忿傍滩蚜梁猴这廓眶操堕门寓弘溯尊哉矽拓软胺枕卢劣胜馒喷比实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要,用人工方法配制而成的基质,其中含有水、碳源、氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生物的生长提供能源

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