最新第二章--紫外可见分光光度法ppt课件.ppt

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1、第二章--紫外可见分光光度法主要内容:&重点难点:q紫外可见分光光度分析的基本原理紫外可见分光光度分析的条件选择紫外可见分光光度计的基本构造和使用流程qqqq重点朗伯-比耳定律、分光光度分析的条件选择。难点朗伯-比耳定律。第一章 分光光度分析(Vis-UVSpectrophotometry)第二章紫外可见分光光度法1.概念:分光光度法是根据物质的吸收光谱和光的吸收定律,对物质进行定量、定性分析的一种仪器分析方法。2.方法分类:根据测定时所选用的光源:可见分光光度法(400800nm)紫外分光光度法(200400nm)红外分光光度法(8

2、00nm50m)一.紫外可见分光光度计的基本组成光源单色器吸收池检测器读出系统1.光源在所需光谱区域内发射连续的、足够强度、稳定的辐射光。可见区:钨灯;紫外区:氢灯、氘灯通常用6~12V钨丝灯作可见光区的光源,最适宜的使用范围在360—800nm。光源应该稳定,即要求电源电压保持稳定。为此,通常在仪器内同时配有电源稳压器。/nm钨灯(热辐射光源)4006008001000氙灯(气体放电光源)氢灯强度氙灯氢灯钨灯色散原理:依据不同波长光通过棱镜时折射率不同分光入射狭缝准直透镜棱镜聚焦透镜出射狭缝白光红紫λ1λ28006005004002.单

3、色器单色器是将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。单色器由棱镜或光栅等色散元件及狭缝和透镜等组成。其中色散元件是关键部件。棱镜是根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光,然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸收池上。它由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围,石英棱镜则在紫外和可见光范围均可使用。光栅:在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。M1M2出射狭缝光屏透镜平面透射光栅光栅衍射示意图原理:利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光.光栅是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不

4、同波长的单色光,然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大,可用的波长范围也较宽。入射狭缝:光源的光由此进入单色器,用于限制杂散光进入单色器准直镜:透镜或凹面反射镜,使入射光成为平行光束色散元件:棱镜或光栅,将复合光分解成单色光准直镜:透镜或凹面反射镜,将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝出射狭缝:用于限制通带宽度3.吸收池吸收池也称比色皿,用于盛放参比溶液或待测溶液。它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的,按其厚度分为0.5cm,1cm,2cm,3cm和5cm。在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池,紫外区则

5、使用石英吸收池。使用比色皿时应注意保持清洁、透明,避免磨损透光面。使用时注意点4.检测器检测器的作用是接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。分为光电管和光电倍增管。光电管是一个真空或充有少量惰性气体的二极管。阴极是金属做成的半圆筒,内侧涂有光敏物质,阳极为一金属丝。光电管依其对光敏感的波长范围不同分为红敏和紫敏两种。红敏光电管是在阴极表面涂银和氧化铯,适用波长范围为625—1000nm;紫敏光电管是阴极表面涂锑和铯,适用波长范围为200—625nm。光电倍增管是由光电管改进而成的,管中有若干个称为倍增极的附加电极。因此,可使光激发的电

6、流得以放大,一个光子约产生106~107个电子。它的灵敏度比光电管高200多倍。适用波长范围为160~700nm。光电倍增管在现代的分光光度计中被广泛采用。5.显示装置显示装置的作用是把放大的信号以吸光度A或透光率T的方式显示或记录下来。分光光度计常用的显示装置是检流计、微安表、数字显示记录仪。二、紫外可见分光光度计类型1.单光束分光光度计2.双光束分光光度计3.双波长分光光度计721分光光度计0.575光源单色器吸收池检测器显示单波长单光束分光光度计简单,价廉,适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有

7、很高的稳定性,且操作麻烦,任一波长的光均要用参比调T=100﹪后,再测样品仪器可见分光光度计双光束分光光度计比值光源单色器吸收池检测器显示光束分器自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。裂仪器紫外-可见分光光度计双波长分光光度计光源单色器单色器切光源检测器吸收池不需要参比溶液;可以消除背景吸收干扰;适合多组分混合物、浑浊试样的定量分析,可进行导数光谱分析。价格昂贵三、仪器使用基本流程紫外可见分光光度计1、分光光度计的保养与维护2、操作的注意事项3、定性分析依据???定量依

8、据???定性分析基础定量分析基础物质对光的选择性吸收在一定实验条件下,A∝cAc增大ABA第二节紫外可见分光光度法的定性分析1.分子吸收光谱的产

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